[發明專利]一種綠藻多糖及其制備方法

有效

• 申請號: 201710290310.5
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN107011456B
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發明（設計）人: 毛文君;劉雪
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P3/06;A61P3/10;A61P7/02;A23L33/125
• 代理公司: 青島聯智專利商標事務所有限公司 37101
• 代理人: 紀麗麗

1.一種綠藻多糖，其特征在于，

所述綠藻多糖是由鼠李糖和葡萄糖醛酸組成的一種硫酸多糖，其中，鼠李糖的摩爾百分比為96.12%，葡萄糖醛酸的摩爾百分比為3.88%；所述綠藻多糖的主鏈由α-L-(1,3)-連接的鼠李糖和α-L-(1,2)-連接的鼠李糖組成，α-L-(1,3)-連接的鼠李糖和α-L-(1,2)-連接的鼠李糖的摩爾比為5：3，在α-L-(1,3)-連接的鼠李糖的C2位存在支鏈；所述綠藻多糖的支鏈由α-L-(1,3)-連接的鼠李糖和末端連接的β-D-葡萄糖醛酸組成，β-D-葡萄糖醛酸位于支鏈的非還原端，β-D-葡萄糖醛酸與鼠李糖之間以1,3糖苷鍵連接；所述綠藻多糖的結構分子式如式Ⅰ所示，其中，n=30，m=0-5， R₁=H 或SO₃H，R₂=H 或SO₃H，R₃=H 或SO₃H，R₄=H 或SO₃H；

式I。

2.如權利要求1所述的綠藻多糖，其特征在于，

所述綠藻多糖的平均分子量為58.4千道爾頓。

3.如權利要求1所述的綠藻多糖，其特征在于，

17.77 %的α-L-(1,3)-連接的鼠李糖被硫酸化形成硫酸基并位于α-L-(1,3)-連接的鼠李糖的C2位，4.15%的α-L-(1,2)-連接的鼠李糖被硫酸化形成硫酸基并位于α-L-(1,2)-連接的鼠李糖的C3位。

4.如權利要求1所述的綠藻多糖，其特征在于，

在所述綠藻多糖的糖鏈中，每10個鼠李糖基中存在一個支鏈。

5.一種如權利要求1-4中任一項所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）向干燥的袋礁膜中加水浸泡形成勻漿，在20℃-24℃下提取0.5-4小時，分離出清液；其中，水的質量為袋礁膜質量的10-60倍；

（2）將所得清液減壓濃縮、脫鹽得到第一多糖溶液，將所述第一多糖溶液減壓濃縮、干燥得到多糖，將所述多糖加水溶解得到第二多糖溶液，所述第二多糖溶液中所述多糖的質量分數為0.1%-6%；

（3）將所述第二多糖溶液通過離子交換色譜柱分離和凝膠色譜柱分離，然后減壓濃縮、脫鹽，將脫鹽后的溶液減壓濃縮、干燥，得到所述綠藻多糖。

6.如權利要求5所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，

所述步驟（1）中，向干燥的袋礁膜中加水浸泡形成勻漿的方法為：將干燥的袋礁膜直接浸泡于水中形成勻漿，或者將干燥的袋礁膜研磨或絞碎后與水混合形成勻漿，或者將干燥的袋礁膜加工成干燥粉末與水混合形成勻漿。

7.如權利要求5所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，

所述步驟（2）和所述步驟（3）中，脫鹽的方法為透析脫鹽。

8.如權利要求5所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，

所述步驟（2）和所述步驟（3）中，干燥的方法為冷凍干燥，或者向減壓濃縮后的多糖溶液中加入1-6倍多糖溶液體積的、質量分數為95%乙醇使多糖沉淀，將所得沉淀在40℃-80℃烘箱中干燥0. 1-6 小時。

9.如權利要求5所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，

所述步驟（3）中，所述離子交換色譜柱為色譜柱Q Sepharose Fast Flow，依次用蒸餾水、0.5 mol/L氯化鈉水溶液、1.0 mol/L氯化鈉水溶液、1.5 mol/L氯化鈉水溶液和2.0mol/L氯化鈉水溶液洗脫。

10.如權利要求5所述的綠藻多糖的制備方法，其特征在于，

所述步驟（3）中，所述凝膠色譜柱為色譜柱Sephacryl S-400 HR，所用的洗脫液為0.2mol/L碳酸氫銨水溶液。