[發明專利]一種頭孢菌素發酵液中還原糖的測定方法

有效

• 申請號: 201710286522.6
• 申請日: 2017-04-27
• 公開（公告）號: CN108802272B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 王秀花;趙鑫;楊勇;常翔宇;努爾買買提;莊紅瑩;鄧旭衡;劉思川
• 申請（專利權）人: 伊犁川寧生物技術有限公司
• 主分類號: G01N31/16
• 分類號: G01N31/16
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種頭孢菌素發酵液中還原糖的測定方法，其特征在于：步驟如下：

(1)取頭孢菌素發酵液，過濾，離心，得上清，采用菲林試劑測定，得到還原糖數值測定值X₁；所述菲林試劑包括CuSO₄溶液、酒石酸鉀鈉和氫氧化鈉混合液和30％碘化鉀溶液；所述測定的方法是：取上清每0.5ml，加入10ml菲林試劑中，搖勻后100℃條件下水浴加熱10分鐘；取出，迅速冷卻，加入HCl溶液5ml，立即用Na₂S₂O₃滴定液滴定至淡黃色時，加入1ml0.5％淀粉指示液，使溶液顯藍色，繼續用Na₂S₂O₃滴定至藍色消失為終點；還原糖數值測定值X₁的計算方法是：

X₁＝C×(V₀₁—V_樣1)×6

上式中：

C：Na₂S₂O₃滴定液實際濃度，mol/L；

V_樣1：樣品消耗Na₂S₂O₃滴定液的體積，ml；

V₀₁：空白消耗Na₂S₂O₃滴定液的體積，ml；

(2)計算影響值，影響值X₂＝0.4335×頭孢菌素效價+0.0181；其中，根據高效液相法檢測頭孢菌素效價，頭孢菌素效價的單位是萬u/ml；

(3)(X₁-X2)的值即為頭孢菌素發酵液中還原糖的實際值。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中，過濾是采用中速濾紙過濾，離心的轉速是500r/min，時間是1min。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

CuSO₄溶液按照如下方法制備：稱取CuSO₄·5H₂O 62.5g，用水溶解并稀釋至1000ml，搖勻，即得；

酒石酸鉀鈉和氫氧化鈉混合液按照如下方法制備：稱取188g酒石酸鉀鈉和125g氫氧化鈉，用水溶解并稀釋至1000ml，搖勻，即得；所述酒石酸鉀鈉為C₄H₄KNaO₆·4H₂O；

30％碘化鉀溶液按照如下方法制備：稱取150g碘化鉀，用水溶解并稀釋至500ml，搖勻，即得。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述HCl溶液的濃度為6mol/L。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述Na₂S₂O₃濃度為0.1mol/L。