[發明專利]一株黃綠木霉T-321010菌株及其培養方法與應用

有效

• 申請號: 201710279979.4
• 申請日: 2017-04-26
• 公開（公告）號: CN107043711B
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 陳建愛;陳為京
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院農產品研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/38;A01P3/00;A01P21/00;C05G3/60;C05G3/80;C12R1/885
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 朱家富

1.一株黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株，2011年12月22日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCC No.5638，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所。

2.權利要求1所述黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌劑的制備方法，其特征在于，步驟如下：

(1)將黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株接種于PDA固體培養基中，在25～27℃活化培養6d～9d，制得活化菌株；

(2)將步驟(1)制得的活化菌株接種至PD液體培養基中，在25～27℃搖瓶培養36h～48h，制得液體種子；

(3)將步驟(2)制得的液體種子接種至液體發酵培養基中，在25～27℃的條件下發酵培養，制得發酵液；

(4)將步驟(3)制得發酵液按質量百分比10％～30％的比例接種于固體發酵培養基中，在20℃～30℃、含水量50％～60％、空氣相對濕度80％～100％的條件下，固體發酵72h～96h；然后經干燥至含水量為5～10％，即得。

3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中的液體發酵培養基，每升組分如下：

玉米粉12～18g，葡萄糖4～6g，豆粉4～6g，磷酸氫二鉀0.8～1.2g，碳酸鈣4～6g，水定容至1L，pH6.0。

4.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，發酵培養包括三級液體發酵，具體步驟如下：

a、將步驟(2)制得的液體種子按體積比1％～5％的比例接種至液體發酵培養基中，在25～27℃的條件下，進行一級種子發酵培養36h～48h，制得一級種子液；

b、將一級種子液按體積比3％～8％接種至液體發酵培養基中，在25～27℃的條件下，進行二級發酵培養30h～40h，制得二級發酵液；

c、將二級發酵液按體積比5％～10％接種至液體發酵培養基中，在25～27℃、通氣量1：0.6-0.8、攪拌速度為200r/min的條件下，進行三級發酵培養30h～40h，制得發酵液。

5.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，固體發酵培養基按如下方法制備：

將麥麩65～75份、作物秸稈粉末25～35份混合后，加入混合物質量1.1～1.3倍的水，攪拌均勻，調pH 6～6.5，即得。

6.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，干燥先進行通風晾干24～48h；然后去除培養基上的覆蓋物，再自然晾干24～48h；然后翻倒培養基再33～37℃條件下，干燥至含水量5～10％。

7.權利要求1所述黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株在制備生防菌劑中的應用。

8.一種農用復合劑，其特征在于，包括權利要求2制備的黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌劑0.5～45份，復配物55～99.5份，均為重量份；

所述復配物選自可溶性甲殼素、豆粕、甲基托布津、農家肥或黃腐酸鉀。