[發(fā)明專(zhuān)利]一株黃綠木霉T-321010菌株及其培養(yǎng)方法與應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710279979.4 | 申請(qǐng)日： | 2017-04-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN107043711B | 公開(kāi)（公告）日： | 2020-08-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳建愛(ài);陳為京 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品研究所 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14;A01N63/38;A01P3/00;A01P21/00;C05G3/60;C05G3/80;C12R1/885 |
| 代理公司： | 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250100 山東*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 黃綠 321010 菌株 及其 培養(yǎng) 方法 應(yīng)用 | ||
1.一株黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株，2011年12月22日保存于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)CGMCC No.5638，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。
2.權(quán)利要求1所述黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌劑的制備方法，其特征在于，步驟如下：
(1)將黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株接種于PDA固體培養(yǎng)基中，在25～27℃活化培養(yǎng)6d～9d，制得活化菌株；
(2)將步驟(1)制得的活化菌株接種至PD液體培養(yǎng)基中，在25～27℃搖瓶培養(yǎng)36h～48h，制得液體種子；
(3)將步驟(2)制得的液體種子接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25～27℃的條件下發(fā)酵培養(yǎng)，制得發(fā)酵液；
(4)將步驟(3)制得發(fā)酵液按質(zhì)量百分比10％～30％的比例接種于固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在20℃～30℃、含水量50％～60％、空氣相對(duì)濕度80％～100％的條件下，固體發(fā)酵72h～96h；然后經(jīng)干燥至含水量為5～10％，即得。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，每升組分如下：
玉米粉12～18g，葡萄糖4～6g，豆粉4～6g，磷酸氫二鉀0.8～1.2g，碳酸鈣4～6g，水定容至1L，pH6.0。
4.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，發(fā)酵培養(yǎng)包括三級(jí)液體發(fā)酵，具體步驟如下：
a、將步驟(2)制得的液體種子按體積比1％～5％的比例接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25～27℃的條件下，進(jìn)行一級(jí)種子發(fā)酵培養(yǎng)36h～48h，制得一級(jí)種子液；
b、將一級(jí)種子液按體積比3％～8％接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25～27℃的條件下，進(jìn)行二級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)30h～40h，制得二級(jí)發(fā)酵液；
c、將二級(jí)發(fā)酵液按體積比5％～10％接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25～27℃、通氣量1：0.6-0.8、攪拌速度為200r/min的條件下，進(jìn)行三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)30h～40h，制得發(fā)酵液。
5.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，固體發(fā)酵培養(yǎng)基按如下方法制備：
將麥麩65～75份、作物秸稈粉末25～35份混合后，加入混合物質(zhì)量1.1～1.3倍的水，攪拌均勻，調(diào)pH 6～6.5，即得。
6.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，干燥先進(jìn)行通風(fēng)晾干24～48h；然后去除培養(yǎng)基上的覆蓋物，再自然晾干24～48h；然后翻倒培養(yǎng)基再33～37℃條件下，干燥至含水量5～10％。
7.權(quán)利要求1所述黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株在制備生防菌劑中的應(yīng)用。
8.一種農(nóng)用復(fù)合劑，其特征在于，包括權(quán)利要求2制備的黃綠木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌劑0.5～45份，復(fù)配物55～99.5份，均為重量份；
所述復(fù)配物選自可溶性甲殼素、豆粕、甲基托布津、農(nóng)家肥或黃腐酸鉀。
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