[發(fā)明專利]一種適用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的飼養(yǎng)裝置及其使用方法

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• 申請日: 2017-04-25
• 公開（公告）號: CN106973864A
• 公開（公告）日: 2017-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳靜;張道偉
• 申請（專利權(quán)）人: 遵義醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033
• 代理公司: 重慶強(qiáng)大凱創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙)50217
• 代理人: 黃書凱

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及水稻重要害蟲白背飛虱基因功能研究輔助工具技術(shù)領(lǐng)域，更涉及的是一種適用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的飼養(yǎng)裝置及其使用方法。

背景技術(shù)

水稻是我國重要的糧食作物，產(chǎn)量在各種糧食作物中位居首位。白背飛虱隸屬同翅目，飛虱科害蟲，不僅刺吸取食水稻從而危害水稻的正常生長，更能傳播植物病毒，造成水稻株癱瘓倒伏，水稻減產(chǎn)甚至絕收。從白背飛虱的本質(zhì)即基因水平研究白背飛虱各基因的功能將有助于這一害蟲的研究和防治。RNA干擾（RNA interference，縮寫為RNAi）是指一種由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象。由于使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉特定基因的表達(dá)，所以該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于探索基因的功能。

RNAi技術(shù)自發(fā)現(xiàn)以來，已廣泛應(yīng)用于昆蟲基因功能的研究中，但是針對白背飛虱的基因功能研究技術(shù)卻未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)缺乏白背飛虱的基因功能防治技術(shù)的問題，提供一種注射后便于觀察和取樣的飼養(yǎng)裝置，為白背飛虱基因功能的研究及防治提供便利。

具體方案為：一種適用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的飼養(yǎng)裝置，包括透明塑料瓶和用于培養(yǎng)水稻的基質(zhì)層，所述基質(zhì)層位于透明塑料瓶瓶內(nèi)的底部，所述透明塑料瓶的瓶身上設(shè)有開口，位于所述開口處的瓶身上鉸接有能防止白背飛虱進(jìn)出的門體，所述門體上設(shè)有活性炭層和與開口配合使用的磁性鎖，所述門體開設(shè)有取樣口，取樣口上鉸接有取樣門。

進(jìn)一步的，所述透明塑料瓶的上部開設(shè)有瓶口，所述瓶口上套設(shè)有紗布。瓶口和紗布的目的是提高裝置的透氣效果。

一種適用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的飼養(yǎng)裝置的使用方法，包括以下步驟：

步驟一、飼養(yǎng)裝置的安裝：將門體打開，將基質(zhì)層鋪設(shè)在瓶底，下層浸潤水稻營養(yǎng)液，將帶根幼苗期水稻清洗干凈，擦干水漬后插入基質(zhì)層中，直立并固定；

步驟二、白背飛虱的投放：將已注射特異基因dsRNA的白背飛虱從門體處放入透明塑料瓶中，關(guān)閉門體；

步驟三、抽樣：培養(yǎng)24h后，觀察白背飛虱表型的變化，每隔24h通過取樣口取蟲觀察，取4~5次，記錄實驗結(jié)果。

進(jìn)一步的，所述特異基因dsRNA為白背飛虱特定基因的雙鏈RNA，所述特定基因包括免疫基因、生長發(fā)育相關(guān)基因或者其他功能基因，所述生長發(fā)育相關(guān)基因包括蛻皮激素受體基因EcR、幾丁質(zhì)合成酶基因Chs和海藻糖酶基因Treh，所述免疫基因包括Toll基因和Akirin基因。

本發(fā)明的工作原理及有益效果：用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的裝置，利用透明塑料瓶易加工改裝，同時透光方便觀察以及不影響水稻光合作用的特點(diǎn)，在瓶身上開設(shè)開口，開口鉸接門體，門體上設(shè)有活性炭層和磁性鎖，活性炭層設(shè)置在門體上將瓶內(nèi)的環(huán)境與外部環(huán)境相對隔開，空氣經(jīng)活性炭層過濾后再進(jìn)入瓶內(nèi)，使空氣變得純凈，避免污染后的空氣對白背飛虱的生長造成影響，在遇到特殊情況，例如火災(zāi)或者有毒氣體泄漏的情況下，本發(fā)明的裝置可以確保瓶內(nèi)的白背飛虱在10~20min鐘內(nèi)依然不受到影響，給實驗人員提供挽救的時間，避免前期工作的浪費(fèi)；通過磁性鎖與開口連接并鎖緊，輕輕一拉一推即可打開關(guān)閉，操作更加方便，同時更利于水稻和基質(zhì)層的安裝，基質(zhì)層為棉花層或者土壤層，水稻在水稻營養(yǎng)液和光照的作用下，在飼養(yǎng)裝置內(nèi)生長，給白背飛虱提供食物；再將已注射特異基因dsRNA的白背飛虱投放到飼養(yǎng)裝置內(nèi)，在培養(yǎng)的過程中，利用門體上的取樣口對白背飛虱進(jìn)行取樣，避免取樣時直接通過開口，而開口又過大，白背飛虱飛出裝置影響試驗效果，補(bǔ)充水稻營養(yǎng)液時也可以通過取樣口操作；本裝置的各部件容易得到，具有結(jié)構(gòu)簡單和經(jīng)濟(jì)實用的特點(diǎn)，更適用于利用RNA干擾技術(shù)用于白背飛虱基因功能的研究。

附圖說明

圖1為本發(fā)明適用于白背飛虱注射法RNA干擾實驗的飼養(yǎng)裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實施方式

下面通過具體實施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明：

通過下面實施例說明本發(fā)明的具體實施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍，不局限于此。

附圖標(biāo)記：紗布1、瓶口2、瓶身3、水稻4、取樣門5、取樣口6、門體7、棉花層8。