[發明專利]人血清淀粉樣蛋白A1功能性短肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710271556.8
• 申請日: 2017-04-24
• 公開（公告）號: CN108727484B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 葉德全;陳明杰;周慧斌
• 申請（專利權）人: 上海交通大學;澳門大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;C12N15/81;C12N1/19;A61K38/17;A61P29/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 黃麗珍;劉真真

本發明公開了一種人血清淀粉樣蛋白A1功能性短肽及其制備方法和應用。具體地，本發明提供一種人血清淀粉樣蛋白A1多肽片段或其藥學上可接受的鹽，所述的多肽片段具有以下特征：(i)該多肽片段的序列來源于人血清淀粉樣蛋白A1的氨基酸序列；和(ii)該多肽片段為人血清淀粉樣蛋白A1(SAA1)全長氨基酸序列(104氨基酸)的第M位到第N位，且長度為42?67個氨基酸，其中M為9?14的任一正整數，N為55?75的任一正整數。本發明的人血清淀粉樣蛋白功能性短肽具有抑制致炎細胞因子表達、促進抗炎細胞因子表達的能力，可用于制備治療炎癥疾病的藥物。

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及一種人血清淀粉樣蛋白A1功能性片段及其制備方法和應用。

背景技術

血清淀粉樣蛋白A(Serum Amyloid A,SAA)是機體受到感染和損傷時分泌的一種主要的急性期蛋白。SAA是一個多態性蛋白的總稱，由相關但各具獨立基因的蛋白(SAA1-SAA4)組成。其中，人血清淀粉樣蛋白A1(SAA1)由104個氨基酸組成，主要由肝細胞合成，人SAA2與SAA1有7個氨基酸的差別，它們均為急性時相蛋白。SAA3是一個假基因，SAA4在急性時相反應中變化不大，在機體中持續少量產生。

研究表明，SAA在急性和慢性炎癥患者血清內含量均有大量上升，因此是一個反映感染性和非感染性炎癥疾病的重要生物檢測指標。SAA不僅是慢性阻塞性肺病急性加重期的生物標志物，也是急性心?；颊咴诮邮芗痹\冠狀動脈介入手術后發生心臟破裂的預期因子，這為早期發現心臟破裂患者提供了重要參考指標。其他大量研究也表明，在胰腺炎、肝炎、冠心病、糖尿病、慢性腎臟疾病、類風濕性關節炎、炎性腸炎、急性和慢性肺炎及肥胖病例中，SAA升高與疾病活動和病程發展有非常密切的關系。目前臨床研究還認為，所有急性期反應蛋白中，SAA對急性炎癥反應最敏感，升值幅度最大。同時研究還表明SAA與甲胎蛋白等腫瘤相關蛋白相似，其在血清中的濃度與癌癥發生呈正相關。因此，在臨床上對SAA在病人血清中含量的檢測具有輔助診斷價值。

同時，SAA不僅是一種簡單的炎癥標志物，還積極介入疾病的相關過程。在急性感染或者炎癥發生時，血清內SAA的水平可提升1000倍。高水平的SAA將導致淀粉樣病變，而且低密度脂蛋白與SAA的結合物(LDL-SAA)可提高心血管疾病的風險；同時，SAA還具有促炎反應的特性，促進多種細胞因子的分泌，如IL-1β，IL-6，MMPs，CCL20等，這些細胞因子都參與炎癥導致的疾病的發病過程，如，風濕性關節炎，肌肉萎縮，痛風，動脈粥樣硬化等。由于SAA與多種疾病的發生相關，針對SAA的治療方法已越來越受到重視。

目前，已知SAA與六種受體結合，Toll-like receptor(TLR)包括TLR2和TLR4，SRB1(a class B scavenger receptor)，及其G蛋白偶聯受體formyl peptide receptor 2(FPR2)，receptor for advanced glycation endproduct(RAGE)，P2X7receptor)。SAA與不同的受體結合所發揮的生物學活性不一樣，例如，SAA與FPR2結合可誘導滑液超常增生及其內皮細胞的增殖，從而導致類風濕性關節炎的發生；SAA與CD36結合可促進膽固醇的代謝；SAA與SRB1結合可產生炎癥誘發因子，導致動脈粥樣硬化等疾??；SAA與TLR4結合可誘導NO的產生。由此可見，SAA1在機體中發揮多種生物學活性。

為了更明確地對SAA1進行結構及其生物學活性的研究與分析，本專利設計了酵母表達系統，表達沒有脂多糖干擾的重組人SAA1及其結構類似的多肽。這種以酵母為宿主的表達方式不僅擺脫了多年來SAA1研究中所碰到的脂多糖困擾的問題，實現體內外研究不受脂多糖干擾的SAA1的生物學作用，還可利用酵母表達系統表達多種SAA1結構類似的多肽進行功能研究，從而發現SAA發揮活性的結構域和功能域。同時還可利用詳盡的人SAA1不同肽段所發揮的生物學活性的研究結果，設計相應的阻斷劑，為臨床治療提供潛在的候選藥物。

然而，本領域尚缺乏令人滿意的能夠有效抑制致炎細胞因子，從而可有效治療炎癥或炎癥相關疾病的藥物。