[發明專利]一株能夠降解土壤殘留二氯喹啉酸的不動桿菌

有效

• 申請號: 201710267837.6
• 申請日: 2017-04-22
• 公開（公告）號: CN107338197B
• 公開（公告）日: 2019-11-19
• 發明（設計）人: 顧鋼;范潔茹;周挺;徐進;陳鳳平;周倩;張玥
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司福建省公司;福建農林大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 35100 福州元創專利商標代理有限公司
• 代理人: 蔡學俊<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明公開了一株能夠降解二氯喹啉酸降解菌及其應用。本發明所提供的一株二氯喹啉酸降解菌為不動桿菌J4（Acinetobacter sp.J4），保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏日期為2017年3月16日，保藏編號為CCTCC NO:M 2017129，利用16S rDNA鑒定為不動桿菌。該菌為革蘭氏陰性菌，菌落呈白色、圓形、光滑、邊緣整齊。該菌具有降解二氯喹啉酸的功能。

技術領域

本發明屬于環境污染微生物處理技術領域，具體涉及一株能夠降解土壤殘留二氯喹啉酸的不動桿菌。

背景技術

煙草（Nicotiana tabacum）屬茄科一年生或有限多年生草本植物，起源于南美洲，目前種植遍布世界各地。煙草是一種特殊的經濟作物，我國自1982年實行煙草專賣制度以來，煙草行業得到長足發展并成為國民經濟的一個重要支柱產業。煙草在我國南北各省區均有種植，其主要用途為加工煙葉生產卷煙。因此，優質的煙葉是煙草生產的重要目標，如何保證優質的煙葉也是煙農關心的重要問題。在福建，煙草種植主要以稻煙輪作方式為主，然而上茬作物水稻常用的農藥如除草劑的使用，嚴重影響了后茬煙草的生長。煙草對除草劑較為敏感，隨著除草劑在水稻田的廣泛使用，煙草生產受到除草劑藥害的現象時有發生，給煙草生產帶來極大的危害。

已有研究表明二氯喹啉酸施用后，在美國阿肯色州有研究者檢測到水稻田附近水域二氯喹啉酸的殘留量可達μg/l級; 利用測滲計模擬水稻田施用二氯喹啉酸的環境行為，結果表明95% 殘留在水稻田的30 cm表層土壤中。土壤中殘留的二氯喹啉酸會影響煙草植株的畸形生長，導致新葉向葉背卷縮，隨后逐漸發展成線狀鼠尾狀葉形。由于二氯喹啉酸的藥害，烤煙的產量和產值均明顯降低，嚴重危害時可降低80%以上，甚至絕收。

微生物法降解殘留農藥具有環境友好，無污染，高效等特點，因此利用生物進行環境修復是近年來的研究熱點。本發明通過田間長期使用二氯喹啉酸的土壤中分離篩選獲得降解菌株，本發明所采用的菌株為泛菌屬菌株，目前尚未見泛菌屬用于土壤殘留二氯喹啉酸降解的報道；本發明菌株來源于土壤，具有環境友好的特點。采用生物法解除煙田殘留除草劑二氯喹啉酸不僅能降低藥害帶給煙草的經濟損失，而且也對保護環境，凈化土壤有不可小覷的意義。

發明內容

為解決上述二氯喹啉酸在土壤中殘留導致煙草產量和產值降低的問題，本發明提供一株能夠降解土壤殘留二氯喹啉酸的不動桿菌。該菌株可有效降解土壤中殘留的二氯喹啉酸，從而提高煙草產量。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一株能夠降解土壤殘留二氯喹啉酸的不動桿菌，經鑒定，所述菌株為不動桿菌J4（Acinetobacter sp. J4），已保藏于中國典型培養物保藏中心CCTCC，地址：中國 武漢 武漢大學，郵政編碼：430072；保藏日期為2017年3月16日，保藏編號為CCTCC NO: M 2017129。

本發明菌株J4通過如下方法富集得到：

本試驗從福建煙田采集土壤，利用富集法篩選獲得，其篩選過程如下：

（1）二氯喹啉酸降解菌的富集：取0.1g土壤與100 ml MM培養基混合，并加入二氯喹啉酸使其終濃度為100 μg/ml，于30℃，150 r/min培養1周；取培養液1 ml加入100 ml含同樣濃度除草劑的新鮮培養基中，同時于固體培養基劃線以確認有細菌生長，同樣條件培養1周；連續轉代培養10次后，經平板劃線分離，獲得單菌落菌株。