[發明專利]一種基于魚鰾制備膠原蛋白海綿的方法

在審

• 申請號: 201710266808.8
• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN107412844A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 陳建峰;宋昊
• 申請（專利權）人: 陳建峰
• 主分類號: A61L24/00
• 分類號: A61L24/00
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司11403
• 代理人: 馬驍

技術領域

本發明涉及一種基于魚鰾制備膠原蛋白海綿的方法，屬于醫藥材料制備領域。

背景技術

膠原蛋白是動物結締組織中的主要成分，其在哺乳動物體內占蛋白質總量的25～30%。膠原蛋白也是生物科技產業最具關鍵性的原材料之一，在醫學材料、化妝品、食品工業等均有著廣泛應用。膠原蛋白（也稱膠原）是細胞外基質的一種結構蛋白質，普遍存在于動物體的骨、軟骨、皮膚、肌腱和韌帶中，對機體和臟器起著支持、保護、結合以及形成界隔等作用。除了生物力學方面的以外，還具有諸如信號轉導、生長因子與細胞因子的運輸等功能。

膠原蛋白在食品領域和化妝品領域的應用已得到了人們的一致認可。而膠原蛋白在醫用生物材料方面的研究和應用也已有相關報道，對于膠原蛋白用作止血材料的研究也取得了一定的進展。由于膠原蛋白本質上就是一種天然組織支架材料，因此膠原蛋白成為構建組織工程支架的理想材料，如皮膚、骨組織、血管等器官的支架，之后體內組織細胞爬入支架內與其生長融合，引導組織再生。純膠原蛋白組織工程支架具有良好的生物相容性、可塑性、易加工并能有效促進細胞粘附和增殖等優點。但是，膠原蛋白作為純天然高分子，最大的缺點就是力學強度差，降解速度過快，在體內使用時難以有足夠的強度來支撐組織重建，使其不能達到作為細胞支架的要求，且利用其制備的膠原蛋白海綿吸水速率慢，吸水倍率低，力學強度低，生物活性差。因此，研究開發一種吸水速度快，吸水倍數及力學強度高，生物活性良好的膠原蛋白海綿具有重要的現實意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題：針對目前膠原蛋白海綿吸水速率慢，吸水倍率低，力學強度低，生物活性差的問題。提供了一種基于魚鰾制備膠原蛋白海綿的方法。

為解決上述技術問題，本發明采用如下所述的技術方案：

一種基于魚鰾制備膠原蛋白海綿的方法，具體制備步驟為：

（1）將魚鰾與黑木耳按質量比5:1～7:1混合均勻，進行干燥，粉碎，過100目篩，收集過篩顆粒；

（2）將過篩顆粒與質量分數為10％的碳酸鈉溶液按質量比1:4，混合均勻，在105～110℃下加熱20～30min，自然冷卻至室溫后進行冷凍干燥，得冷凍干燥物；

（3）按重量份數計取發酵料，取50～55份蒸餾水、20～25份上述干燥物、12～16份葡萄糖及7～9份150目狗寶粉末；

（4）將發酵料放入發酵罐中，再向發酵罐中加入乳酸直至發酵罐中的發酵料pH至1.5～2.5，向發酵罐中充入氧氣，發酵16～19h，收集發酵罐中發酵混合物；

（5）將發酵罐中的發酵混合物放入壓濾機中以20MPa進行壓濾，收集壓濾液，對壓濾液進行離心分離，收集上清液；

（6）將上清液、氯化鈉、純度為99.4％的鈦粉及1，8-桉葉素混合均勻，置于4～7℃靜置過夜，再進行過濾，收集濾渣；

（7）將濾渣與0.1M及pH為7的磷酸鹽緩沖液按質量1:2混合均勻，放入透析袋中，透析溫度為6～8℃，使用0.4mol/L乙酸透析24h，再使用蒸餾水透析48h，將透析袋中的剩余物放入模具中，并將模具置于冷卻器中，設定溫度為-30～-25℃，冷凍過夜后，將模具取出置于紫外滅菌器中殺菌消毒，進行脫模，收集脫模物，即可得膠原蛋白海綿。

所述步驟（3）中發酵料還可以含有9～12份酵母浸膏。

所述步驟（4）中發酵罐溫度為35～40℃。

所述步驟（4）中充入氧氣的速率為20～25mL/min。

所述步驟（6）中上清液、氯化鈉、純度為99.4％的鈦粉及1，8-桉葉素的質量比為95～100:14～16:2～4:1.3～2.3。

所述步驟（7）中透析袋的截留分子量為7000～9000。

本發明與其他方法相比，有益技術效果是：

（1）本發明利用魚鰾作為基料，黑木耳作為輔助料，通過干燥粉碎后，利用碳酸鈉溶液對其進行蒸煮脫脂，去除雜質，再利用狗寶中豐富的微生物及酶，對脫脂物進行微生物提取，同時利用狗寶中的酸及有益物對提取物進行改性，增加生物活性，改變膠原蛋白結構，形成空間網狀結構，增加吸水性，進而提高膠原蛋白海綿吸水速率及吸水倍率；

（2）本發明在提取過程中對纖維素進行氧化處理，增加止血因子，提高止血性，同時黑木耳的提取物，增加膠原蛋白的恢復性，再通過增加鈦與蛋白物進行結合，增加力學性能，進而提高膠原蛋白海綿的力學強度；

（3）本發明制備的膠原蛋白海綿吸水速率快，吸水倍率高，力學強度高及生物活性強，制作成本低；