[發明專利]一種負載生物活性玻璃微粒皮膚再生材料的制備方法

在審

• 申請號: 201710262346.2
• 申請日: 2017-04-20
• 公開（公告）號: CN106913903A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 李丹榮
• 申請（專利權）人: 李丹榮
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/20;A61L27/16;A61L27/10;A61L27/60;A61L27/50
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發明涉及皮膚科學領域，具體是一種負載生物活性玻璃微粒皮膚再生材料的制備方法。

背景技術

皮膚是人體最大的器官，主要由表皮層、真皮層和皮下組織構成，同時含有豐富的血管和神經。日常生活中由于各種原因如創傷、燒傷、潰瘍、手術及先天性畸形等很容易造成皮膚的缺損。皮膚組織雖然具有較強的再生能力，但是對于大面積的全層皮膚缺損，由于真皮層的缺失，皮膚的再生能力明顯不足。治療全層皮膚缺損的關鍵是重建和再生真皮組織，促進創面盡早封閉，避免微生物入侵等并發癥。迄今為止，自體皮移植仍然是臨床治療全層皮膚缺損最有效的方法。但是該方法面臨著自體皮供應不足的缺點，如Ⅲ度燒傷面積超過30％時供皮部位就已不足。另一個常用的治療方法就是采用人工皮膚。目前國際市場上人工皮膚有Apligraf、Integra、Transcyte、AlloDerm和Dermagraft等。

皮膚再生材料血管化速度是影響其再生性能、決定材料移植成活率的關鍵。由于皮膚再生材料中缺乏相互連通的血管網絡，難以實現與創面區血管的快速連接。在移植初期，皮膚再生材料中的細胞所需要的營養物質主要依靠擴散作用來實現。在血供實現以前，皮膚再生材料中細胞的增殖和分化等功能常因營養成分的缺乏而受限，甚至導致細胞調亡，從而影響其再生速度和存活率。目前的皮膚再生產品的血管化速率較慢，植入物完全血管化一般需要幾周(2-4周)的時間，增加了病人的住院時間和感染風險。因此，如何促進皮膚再生材料的血管化速度，進而縮短創面缺血時間，提高移植存活率，是皮膚再生與修復研究中亟待解決的關鍵問題。

為了提高皮膚再生材料的血管化速度，采用在植入物上負載血管化因子如內皮細胞生長因子(VEGF)、血小板源性生長因子(PDGF)等方法，取得了積極的效果。但由于生長因子不穩定，容易降解，而且直接注射生長因子需要多次重復操作，帶來了極大的不便。使用能夠快速促進機體自身分泌血管化細胞因子的生物活性支架材料成為一種可行的選擇，也是人們研究的一個熱門。

發明內容

本發明的目的在于提供一種負載生物活性玻璃微粒皮膚再生材料的制備方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種負載生物活性玻璃微粒皮膚再生材料的制備方法，具體步驟如下：

步驟一，將正硅酸乙酯和磷酸三乙酯在2mol/L的硝酸催化下水解形成溶膠，后加入硝酸鈣攪拌均勻，經過陳化、干燥、粉磨并且在680-720攝氏度下煅燒2-3小時后得到玻璃粉體；

步驟二，用質量分數為0.05％的Na₂CO₃溶液煮沸處理生絲5次，每次1小時，溫度為100攝氏度，浴比l:100，用蒸餾水充分洗凈，自然干燥，得到純絲素纖維，用摩爾比為1:2:8的CaCl₂、CH₃CH₂OH和H₂O三元溶劑溶解，溶液與生絲質量比為10：1，于75-80攝氏度下攪拌溶解1-2小時得到混合溶液，冷卻后得到的溶液注入纖維素透析膜中，在流水中透析2-4天，將透析后的溶液風干濃縮，得到絲素蛋白濃縮水溶液；

步驟三，用質量分數為0.3％-5％的乙酸溶液分別配制質量分數為0.1％-1％的絲素蛋白溶液和質量分數為0.1％-1％的殼聚糖溶液，將玻璃粉體、聚乙烯醇、殼聚糖溶液和絲素蛋白溶液混合并且攪拌均勻，其中殼聚糖溶液與絲素蛋白溶液的質量之比為1：4,每10ml殼聚糖溶液和絲素蛋白溶液的混合溶液之中含有1g玻璃粉體和0.5-3g的聚乙烯醇，再進行真空脫泡即可得到聚乙烯醇-生物活性玻璃-殼聚糖-絲素蛋白共混液，將聚乙烯醇-生物活性玻璃-殼聚糖-絲素蛋白共混液注入模具中，采用冷凍-干燥法，在零下50至零下5攝氏度的溫度下冷凍干燥，獲得聚乙烯醇-生物活性玻璃-殼聚糖-絲素蛋白四維多孔支架；將聚乙烯醇-生物活性玻璃-殼聚糖-絲素蛋白四維多孔支架與質量分數為0.05％-1％的戊二醛溶液中交聯1-48小時，反復清洗后，再次在零下50至零下5攝氏度的溫度下冷凍干燥，即可得到成品。

作為本發明進一步的方案：步驟一中粉磨后的生物玻璃微粒的顆粒度在5μm-20μm粒度范圍的顆粒不小于90％，不允許有多于5％的顆粒其上限值大于20μm粒度尺寸的顆粒存在。

作為本發明再進一步的方案：步驟三中聚乙烯醇-生物活性玻璃-殼聚糖-絲素蛋白支架的孔隙率為90％-100％，孔徑為100μm-120μm。