[發(fā)明專利]一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710262276.0
• 申請日: 2017-04-20
• 公開（公告）號: CN106950319B
• 公開（公告）日: 2019-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳福欣;嚴(yán)貝貝;劉靜;加曉丹;陳蘇英;龔頻
• 申請（專利權(quán)）人: 西安科技大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)樣品的準(zhǔn)備：將生物樣品或生物樣品的勻漿液與乙腈混合以沉淀蛋白，通過離心分離沉淀，將離心所得上清液吹干，得到待分析樣品；或?qū)⒎巧飿悠酚靡译嫒芙狻⒍ㄈ莺蟮玫酱治鰳悠罚?/p>

2)確定手性色譜分離條件：根據(jù)(R)-特魯曲班和(S)-特魯曲班的分離度≥1.5的要求，手性高效液相色譜分離中采用的流動相為甲醇或乙腈與水、易揮發(fā)性緩沖鹽以及易揮發(fā)性酸的混合溶液，混合溶液中所述緩沖鹽的濃度為0.1-10mM，所述酸的體積分?jǐn)?shù)為0.01-0.5％，甲醇或乙腈與水的體積比為1.5-4:1；柱溫為5-50℃；進樣量為1-10μL；流動相流速為0.1-1mL/min，等度洗脫；

3)確定質(zhì)譜/質(zhì)譜工作條件：采用三重四級桿質(zhì)譜以及多反應(yīng)監(jiān)測掃描模式；母離子和子離子分別為408.1和223.1；錐孔電壓為30-50V；碰撞能量為35-50eV；

4)光學(xué)異構(gòu)體含量測定：對待分析樣品進行手性高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜分析，然后利用外標(biāo)法計算樣品中的(R)-特魯曲班和(S)-特魯曲班的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述生物樣品選自血漿、組織液、體液或生物組織。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述非生物樣品為環(huán)境監(jiān)測物或特魯曲班的制劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述步驟1)中，沉淀蛋白所用乙腈的體積為生物樣品體積的至少4倍。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述手性高效液相色譜采用反相涂敷型或鍵合型手性色譜柱，手性填料包括多糖衍生物類填料。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述緩沖鹽選自甲酸銨、乙酸銨、碳酸銨或碳酸氫銨，所述酸選自甲酸、乙酸或三氟乙酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述質(zhì)譜/質(zhì)譜的工作條件還包括：駐留時間為0.12-0.16s；ESI離子源溫度為100-130℃；干燥氣的溫度為300-450℃，干燥氣的流速為400-700L/h；毛細管電壓為2.0-3.5KV。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測特魯曲班光學(xué)異構(gòu)體含量的方法，其特征在于：所述外標(biāo)法采用的標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍為0.1-100ng/mL。