[發明專利]鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT?LAMP檢測引物組、試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201710262138.2
• 申請日: 2017-04-20
• 公開（公告）號: CN106893787A
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發明（設計）人: 謝芝勛;范晴;謝志勤;謝麗基;黃莉;黃嬌玲;張艷芳;曾婷婷;王盛;羅思思;鄧顯文;劉加波;龐耀珊
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司11279
• 代理人: 朱志寬

1.一種鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測引物組，其特征在于，包括2組特異性引物，其中1組為FMDV-F3、FMDV-B3、FMDV-FIP(F1c-F2)和FMDV-BIP(B1c-B2)，另1組為VSV-F3、VSV-B3、VSV-FIP(F1c-F2)和VSV-BIP(B1c-B2)，其分別具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.8所示的序列。

2.根據權利要求1所述的鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測引物組，其特征在于，所述的引物FMDV-FIP(F1c-F2)的5’端標記FITC熒光基團，該基團在520nm波長下呈黃綠色；所述的引物VSV-FIP(F1c-F2)的5’端標記CY5.5熒光基團，該基團在670nm波長下呈大紅色。

3.一種鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測試劑盒，其特征在于，其反應體系為25μL：1μL RNA模板，10×buffer 2.5μL(成分為200Mm Tris–HCl(pH 8.8)，100mM KCl，80mM MgSO₄，100mM(NH₄)₂SO₄，1％Tween 20，8M betaine，and 14m dNTPs，15U of Bst DNA聚合酶，20U AMV逆轉錄酶，內引物各40pmol，外引物各5pmol。

4.根據權利要求3所述的鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述的內引物為FMDV-FIP，FMDV-BIP，VSV-FIP和VSV-BIP，其分別具有如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的序列；所述的外引物為FMDV-F3，FMDV-B3，VSV-B3和VSV-F3，其分別具有如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的序列。

5.根據權利要求1或2所述的用于鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測引物組、權利要求3或4所述的鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重熒光RT-LAMP檢測試劑盒在鑒別口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒中的應用。