[發明專利]拮抗抑制人PD-1抗原與其配體結合的單克隆抗體及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201710262053.4
• 申請日: 2017-04-20
• 公開（公告）號: CN106939049B
• 公開（公告）日: 2019-10-01
• 發明（設計）人: 胡紅群;陳蕞;宋曉琦;羅師平;蔡明文;范金玲;徐一清;周群敏
• 申請（專利權）人: 蘇州思坦維生物技術股份有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 上海市匯業律師事務所 31325
• 代理人: 王函

1.一種拮抗抑制人PD-1抗原與其配體結合的單克隆抗體或其衍生體，其特征在于，其包含第一可變區和第二可變區，其中所述第一可變區是抗體輕鏈可變區，其抗原互補決定區CDR1，CDR2和CDR3分別為SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4 及SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列；其中所述第二可變區是抗體重鏈可變區，其抗原互補決定區CDR1，CDR2和CDR3分別為SEQID NO：8，SEQ ID NO：9 及SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的抗體或其衍生體，其特征在于，所述第一可變區是抗體輕鏈可變區，為SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列；其所述第二可變區是抗體重鏈可變區，為SEQ IDNO：12所示的氨基酸序列。

3.根據權利要求1或2所述的抗體或其衍生體，其特征在于，其包含所述抗體輕鏈可變區和人抗體輕鏈恒定區，及包含所述抗體重鏈可變區和人抗體重鏈恒定區的鉸鏈區，CH1區，CH 2區和CH3區。

4.根據權利要求3所述的抗體或其衍生體，其特征在于，所述人抗體輕鏈恒定區來自人抗體kappa鏈或抗體lamda鏈，所述人抗體重鏈恒定區來自人IgG1，IgG2，IgG3或IgG4亞型。

5. 一種編碼權利要求2所述抗體或其衍生體的DNA分子或基因，其特征在于，編碼抗體輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID NO：13所示，編碼抗體重鏈可變區的核苷酸序列如SEQID NO：14所示。

6.一種表達載體，其特征在于，它含有權利要求5所述的DNA分子或基因以及與該DNA分子或基因操作性相連的表達調控序列。

7.一種重組宿主細胞，其特征在于，它由權利要求6所述的表達載體轉化而成。

8.根據權利要求7所述的重組宿主細胞，其中所述重組宿主細胞表達權利要求2所述的抗體或其衍生體。

9.一種藥物或藥物組合物，其特征在于，它含有藥學上有效量的如權利要求1或2所述的抗體或其衍生體，以及藥學上可接受的載體。

10.根據權利要求1所述的單克隆抗體或其衍生體在制備治療腫瘤的藥物中的應用。

11.根據權利要求10所述的應用，其特征在于，所述腫瘤為結腸癌。

12.一種制備權利要求1所述的抗體或其衍生體的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

a)提供一表達載體，該表達載體含有權利要求5所述的DNA分子或基因以及與該DNA分子或基因操作性相連的表達調控序列；

b)用步驟a）所述的表達載體轉化宿主細胞；

c)在適合所述抗體表達的條件下培養步驟b)所得的宿主細胞：和

d)采用親合層析從宿主細胞培養液中分離純化獲得所述抗體。