[發明專利]一種ASE法提取黃芩中黃芩苷的方法

在審

• 申請號: 201710259549.6
• 申請日: 2017-04-20
• 公開（公告）號: CN107091889A
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 廖強;陳學松;韋日偉;王麗麗;歐妮
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 蔡國

技術領域

本發明屬于黃芩苷的提取領域，尤其是一種ASE法提取黃芩中黃芩苷的方法。

背景技術

2010年版藥典方法中記載的制備供試品溶液的方法為：取本品中粉約0.3g，精密稱定，加70％乙醇40ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70％乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾人同一量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

該方法回流時間長，且對技術人員的專業水平要求較高。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種ASE法提取黃芩中黃芩苷的方法，該方法提取效果好且耗時短、重復性好。

為了實現上述技術效果，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE法提取黃芩中黃芩苷的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：將黃芩樣品粉碎，過篩，取0.3g與1g石英砂混合；

步驟2：將所得的混合物裝于放有濾膜的ASE萃取池中，加石英砂至與池口平行；

步驟3：用70％乙醇萃取，結束后，將萃取液用70％乙醇定容至50ml，離心，取上清液，即得。

優選地，步驟3所述的萃取參數為：壓力為1500psi，溫度為120℃，萃取時間為5min，循環次數為3次，沖洗體積為100％，吹掃時間為100s。

優選地，步驟2所述的ASE萃取池的體積為10ml。

優選地，步驟3所述的離心參數為：離心速度為15000r/min，離心時間為3min。

本發明與傳統方法相比，具有以下優點：

本發明曾對快速溶劑萃取使用的溶劑進行考察，《中國藥典》使用70％乙醇回流3小時。本實驗選用甲醇、乙醇、70％乙醇作為提取溶劑進行了溶劑考察，結果顯示甲醇與乙醇提取后黃芩苷含量與2015年版《中國藥典》含量下降，原因可能是黃芩苷的極性大，故采用與藥典一致的提取溶劑70％乙醇。

70％乙醇的熔沸點較高，快速溶劑萃取(以下簡稱ASE)提取原理：A:提高溫度降低溶劑的黏度，減少溶劑進入樣品基體的阻止，增加了溶劑進入樣品基體的擴散，降低溶劑和樣品基體之間的表面張力，使溶劑溶解待測物的容量增加；B:萃取液體的沸點隨壓力升高而提高，從而使溶劑在高溫高壓下仍保持在液態(液體對溶質的溶解能力遠大于氣體對溶質的溶解能力)。故我們選擇采用120℃，提取5min，提取3次，即可達到與藥典含量接近，更多的提取時間、溫度、次數對結果已經無明顯影響。最終確定最佳提取工藝組合為提取溫度120℃，提取時間5min，提取次數3次。

附圖說明

圖1為以黃芩苷對照品的濃度(mg/ml)-峰面積進行的線性回歸圖；

圖2為黃芩苷對照品的色譜圖；

圖3為采用藥典方法提取所得的供試品溶液的色譜圖；

圖4為采用ASE法萃取所得的供試品溶液的色譜圖。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明的權利要求保護范圍內所做的有限次修改，仍在本發明的權利要求保護范圍內。

實施例1

1、儀器設備及試劑

1.1儀器：

電子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶劑萃取儀(美國DIONEX公司)、Thermo U3000UHPLC液相色譜儀。

1.2試劑：

水：符合GB/T 6682規定的一級水；

乙醇(CH₄O)：色譜純(液相色譜用)；

石英砂：粒徑2mm。

2、方法

2.1供試品溶液的制備

2.1.1 2010年版藥典方法：

取本品中粉約0.3g，精密稱定，加70％乙醇40ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70％乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾人同一量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.1.2快速溶劑萃取法(ASE)制備供試品方法：

樣品經粉碎機粉碎，過三號篩，精密稱定0.3g，與1g石英砂混合均勻，待用，移入到預先放好過濾膜的10ml萃取池中再加入適量石英砂，輕輕振搖使之與池口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結束后，把萃取液轉移于50ml容量瓶中，用70％乙醇稀釋至刻度，在15000r/min下離心3min，取上清液，進入LC測定。

2.2對照品溶液的制備：