[發明專利]腫瘤疫苗、樹突細胞腫瘤疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201710256411.0
• 申請日: 2017-04-19
• 公開（公告）號: CN107080837B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 趙智輝
• 申請（專利權）人: 南京丹騅生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

本發明涉及將吞噬受體的配體與廣譜的腫瘤細胞表面抗原交聯，交聯物可被樹突細胞通過特定吞噬受體途徑攝入。本發明公開了腫瘤疫苗、樹突細胞腫瘤疫苗及其制備方法。本發明所述方法制備的新型腫瘤疫苗具有靶向特定樹突細胞吞噬受體的特點。這種遞送方式可以是只靶向激活性樹突細胞吞噬受體，因而能夠避免由于抗原進入抑制性樹突細胞吞噬受體途徑所產生的免疫抑制。

技術領域

本發明屬于醫療技術領域，具體涉及腫瘤疫苗、樹突細胞腫瘤疫苗及其制備方法。

背景技術

樹突細胞(dendritic cells，DCs)是體內功能最強大的專職抗原提呈細胞，具有免疫原性和耐受性雙重作用。DCs的免疫原性體現在作為專職APC對自身抗原異常提呈，引起機體免疫系統紊亂。

用制備的腫瘤抗原負載DCs，利用DCs強大的加工、呈遞抗原的能力去激活機體的細胞及體液免疫，從而期望對腫瘤起到預防和治療的目的。這樣的研究已經普遍在實驗室和臨床開展，DCs腫瘤疫苗被證明是安全的，但是效果卻不盡如人意。在針對癌癥病人的免疫治療中，誘導抗腫瘤T細胞反應顯得十分重要。若想用腫瘤細胞或經修飾的腫瘤/自身抗原(tumor/self-Ags)誘導抗腫瘤免疫反應，最大挑戰在于DCs能否有效攝取和處理抗原以激活免疫效應細胞并限制調節性T細胞活性的產生。

DCs攝取抗原的途徑有：吞噬、小胞飲、大胞飲、以及內吞，介導內吞的受體包括Fc受體(I型Fcγ受體CD64和II型Fcγ受體CD32)、整合素(αvβ3或αvβ5)、C型凝集素受體(C-type lectin receptors，CLRs，包括甘露糖受體和DEC205)、凋亡細胞受體、清道夫受體?？乖蛘咄ㄟ^內源性途徑被加工成肽以便MHC I分子呈遞給CD8⁺T細胞，或者通過外源性途徑通過MHC II分子呈遞給CD4⁺T細胞。DCs也可通過兩個途徑交叉呈遞加工抗原。此外它們能通過CLRs識別和獲取含糖結構的抗原，包括MMR(macrophage mannose receptor，巨噬細胞甘露糖受體)、DEC205和DC-SIGN(dendritic cell-specific intercellular adhesionmolecule-3-grabbing non-integrin)。CLRs可作為內吞受體內化抗原以便抗原的加工和呈遞，但是有一些CLRs，如MICL(myeloid C-type lectin-like receptor)和DICR(dendritic cell immunoreceptor)可能是抑制性的。最近，Maurizio Perdicchioa等人發現，被唾液酸修飾的抗原可通過抑制T細胞增殖和誘導調節性T細胞產生造成免疫耐受。腫瘤抗原常發生過度的唾液酸化修飾，DCs通過siglecs(sialic acid-binding Ig-typelectins)攝入唾液酸化抗原就會抑制效應CD4⁺和CD8⁺T細胞的形成。因此，抗原進入樹突細胞的途徑不同，最終產生的免疫應答情況就會不同，可以是激活性的，也可以是抑制性的。

目前制備樹突細胞腫瘤疫苗的主要方法是先將單核細胞或CD34⁺細胞在體外培養制備DCs，然后負載抗原，以TLR配體、細胞因子組合物進行激活，最后注射回輸給病人。根據用于負載樹突細胞的腫瘤抗原的特點可以將其分為兩大類，一類是已經鑒定出的、但數量甚少的腫瘤相關抗原，另一類是未知的、可能是數量龐大的腫瘤相關抗原。對于前者，人們可以通過各種手段將其遞送給樹突細胞，甚至可以選擇特定的遞送途徑；但是，對于后者，目前無法做到將其明確地通過特定的遞送途徑輸入樹突細胞，而只能是含混地將其與樹突細胞共同孵育，任由樹突細胞以各種方式攝取。這種含混的攝入抗原方式極有可能造成樹突細胞通過抑制性的攝入抗原途徑將抗原攝入胞內，特別是過度唾液酸化的腫瘤抗原以抑制性攝入途徑的進入，最終造成腫瘤疫苗治療效果的低下。