[發(fā)明專利]一種氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710253466.6
• 申請日: 2017-04-18
• 公開（公告）號: CN108732288B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發(fā)明（設計）人: 賴麗維;蔣耀權(quán);貢輝
• 申請（專利權(quán)）人: 伽藍（集團）股份有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;袁紅

本發(fā)明公開了一種氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法。該方法包含下列步驟：采用高效液相色譜聯(lián)用紫外分光法分析氨甲環(huán)酸；其中，所述的高效液相色譜聯(lián)用紫外分光法中的色譜柱為CR柱；流動相為磷酸、水和極性有機溶劑的混合溶液；所述的流動相中，所述的極性有機溶劑和水的體積比為20％：80％～80％：20％。本發(fā)明的方法，流動相組成簡單，成本低，操作簡便，同時采用該流動相進行檢測后，色譜柱在正式進樣檢測前平衡時間短，色譜峰峰形對稱無拖尾和前伸，檢測準確性高，單次進樣檢測只需15min，因此樣品分析效率大大提高，而且檢測重現(xiàn)性和準確性也優(yōu)于藥典方法。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及一種氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法。

背景技術(shù)

氨甲環(huán)酸化學名反-4-(氨甲基)環(huán)己烷甲酸，又名止血酸、凝血酸，是一種蛋白酶抑制劑。目前，氨甲環(huán)酸作為化妝品原料中的美白成分已被廣泛關注，它能美白淡化斑點，美白效果比維生素C高約50倍，是果酸的近10倍左右。氨甲環(huán)酸作為美白劑，關鍵品質(zhì)項目為有關物質(zhì)含量控制，品質(zhì)標準中有關物質(zhì)含量≤0.5％，如超出標準則影響產(chǎn)品品質(zhì)。因此，有關物質(zhì)含量控制對產(chǎn)品品質(zhì)保障尤為關鍵。

現(xiàn)有的通過HPLC檢測氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)的方法，都參照《中國藥典》2015版二部方法，國內(nèi)外藥典如《英國藥典》2007版檢測方法相同，共同問題是流動相較復雜。童菲等的《氨甲環(huán)酸有關物質(zhì)及其含量分析方法的研究》和陳玉蘭的《化妝品原料美白劑氨甲環(huán)酸有關物質(zhì)的測定及其含量分析》中，流動相均為：pH 2.5磷酸鹽緩沖液(取11.0g無水磷酸二氫鈉，溶于500mL水中，加5mL三乙胺與1.4g十二烷基硫酸鈉，用稀磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.5，以水稀釋至600mL，即得)-甲醇(60:40)。Goobie及其團隊中，將兩種組分混合作為流動相，其中A組分為70mmol/L的乙酸鈉(pH 6.5)和乙腈(75:25v:v)，B組分為乙腈：水：甲醇(450:400:150v:v:v)。Fiechtner等采用的流動相也較為復雜。

通常氨甲環(huán)酸這類有機分子用液相色譜聯(lián)用紫外分光光度檢測，常使用普通的反相柱，比如C18柱；由于氨甲環(huán)酸分子結(jié)構(gòu)的特殊性，必須使用特殊的緩沖鹽流動相，比如：離子對試劑，從而改善其峰形進行定量檢測。這樣導致流動相非常復雜。

可見，現(xiàn)有技術(shù)中氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法中，流動相的組成較為復雜，成本高，流動相中的水相需要另外配置，操作繁瑣。因此，本領域亟需一種流動相組成簡單、成本低、操作簡便的用于檢測氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)的含量的方法，既有利于企業(yè)對內(nèi)部產(chǎn)品的質(zhì)控，也可用來加強政府部門對市場的監(jiān)控。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)中氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)的含量檢測方法的流動相組成復雜，成本高，水相需要另外配置，操作繁瑣，檢測效率低等缺陷，而提供了一種氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法。本發(fā)明的方法，流動相組成簡單，成本低，操作簡便，同時采用該流動相進行檢測后，色譜柱在正式進樣檢測前平衡時間短，色譜峰峰形對稱無拖尾和前伸，檢測準確性高，單次進樣檢測只需15min，因此樣品分析效率大大提高，而且檢測重現(xiàn)性和準確性也優(yōu)于藥典方法。

對藥典中的氨甲環(huán)酸或其有關物質(zhì)含量的檢測方法的改進有一定的技術(shù)難度。本申請發(fā)明人在研發(fā)之初，試圖調(diào)整藥典方法的流動相，水相僅使用磷酸鹽緩沖溶液的體系，分別配制高低兩個濃度緩沖鹽流動相10mmol/L-50mmol/L磷酸二氫鉀(磷酸調(diào)pH＝2.5)，并嘗試了以鍵合相C18的Kromasil柱、Eclipse Plus柱、以金剛烷為鍵合相的ADME柱，最終未得到對稱的峰形，并無法準確定量。在上述相同的流動相下，本申請的發(fā)明人還嘗試了CR柱，峰形對稱性仍不理想，氨甲環(huán)酸和相關雜質(zhì)分離度有待改進。此外，本申請的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，用高濃度磷酸鹽溶液作為流動相后，極易出現(xiàn)鹽析，對HPLC儀器的泵頭和色譜柱產(chǎn)生危害，降低色譜柱壽命。相比之下，用簡單的磷酸水溶液體系作為流動相更有優(yōu)勢，無固體鹽析出問題對HPLC的系統(tǒng)和色譜柱造成的損壞，降低了HPLC日常維護難度。