[發明專利]一種檢測鼠傷寒沙門氏菌的生物傳感器有效
| 申請號： | 201710252820.3 | 申請日： | 2017-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN107102047B | 公開（公告）日： | 2019-03-26 |
| 發明（設計）人： | 劉素;裴倩倩;黃加棟;王玉;王虹智;郭玉娜 | 申請（專利權）人： | 濟南大學 |
| 主分類號： | G01N27/327 | 分類號： | G01N27/327 |
| 代理公司： | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人： | 張世靜 |
| 地址： | 250022 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 傷寒 沙門氏菌 生物 傳感器 | ||
1.一種檢測鼠傷寒沙門氏菌的生物傳感器，其特征在于，其采用如下制備方法制備而成：
（1）對電極進行預處理；
（2）將iDNA與Helper的混合液修飾到電極表面；
（3）將均相反應產物修飾到電極表面；
所述iDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
所述Helper的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
所述的步驟（3）將均相反應產物修飾到電極表面的操作步驟如下：
① 將14μL滅菌水、2μL 10×的NE Buffer緩沖液、2μL 10 μM P1和2μL 10 μM P2加入離心管中，震蕩30 s，放入90 ℃的恒溫箱中退火10 min，自然冷卻至室溫；
② 將12μL滅菌水、2μL 10×的NE Buffer緩沖液、2μL 10 nM aptamer、2μL 10 nM P3和2μL待測目標物加入離心管中，震蕩30 s，放入37 ℃的恒溫箱中孵育2 h；
③ 將步驟①溶液加入步驟②溶液中，然后再加入2μL 20 U/μL Exonuclease Ⅲ，震蕩30 s，放入37 ℃的恒溫箱中孵育2 h；
④將③中溶液滴加到修飾好電極上，將電極繼續放在37℃的恒溫箱中孵育2h，清洗；
所述aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根據權利要求1所述的生物傳感器，其特征在于，步驟（2）的操作步驟如下：將10μL的10 μM 的iDNA與10 μM Helper的混合液滴加到經過預處理的電極表面，在37℃下孵育2h。
3. 根據權利要求1所述的生物傳感器，其特征在于，步驟（1）電極進行預處理操作為：電極在0.3μm和0.05 μm的氧化鋁漿中進行拋光處理，直到呈鏡面，用PBS和二次水沖洗。
4.根據權利要求1所述的生物傳感器，其特征在于，所述電極為金電極。
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