[發明專利]一種基于JunoTM兒童安全用藥檢測試劑盒及芯片

在審

• 申請號: 201710252659.X
• 申請日: 2017-04-18
• 公開（公告）號: CN108728524A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發明（設計）人: 陽國平;金維榮;郭成賢;秦紅友
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅三醫院;上海南方基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏;周棟

本發明公開了一種基于Juno^TM兒童安全用藥檢測試劑盒和芯片，它們都包括檢測如下位點的引物：HLA基因的HLA?DRB1*15:01?DQB1*06:02位點；HLA基因的HLA?B*57:01位點；HLA基因的HLA?B*15:02位點；HLA基因的HLA?B*58:01位點；MT?RNR1基因的rs267606617位點；MT?RNR1基因的rs267606618位點；MT?RNR1基因的rs267606619位點；CYP2C9基因的rs1057910位點；CYP2C19基因的rs4244285位點；CYP2C19基因的rs4986893位點；CYP2D6基因的rs1065852位點；CYP3A4基因的rs2242480位點。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種基于Juno^TM兒童安全用藥檢測試劑盒及芯片。

背景技術

藥物不合理應用現象十分普遍。我國每年因嚴重藥物不良反應而住院的患者高達250萬人，每年致死人數高達50余萬人，給國家造成巨大的醫療費用負擔和社會經濟負擔。而在兒童患者中，不合理用藥現象更加嚴峻。我國兒童藥物不良反應發生率為12.5％，為成人的2倍。在100多萬聾啞兒童中，約50％為藥物致聾。隨著二胎政策的落實，兒童患者的安全用藥將面臨著持續的巨大挑戰。據不完全統計，從2014年5月至2016年6月，國家級監管部門發布的，與兒童用藥直接相關的各類政策文件多達13項。政策密度前所未有。從醫藥全局角度部署解決兒童安全用藥問題。

在用藥之前，對其安全性進行預測，是防止藥物不良反應發生的有效手段。藥物基因組學的研究從遺傳學角度預測藥物安全性和有效性，為個體化用藥提供了有力的保障。藥物基因組學研究發現遺傳因素是導致藥物不良反應的首要原因。藥物基因組學研究所提供的生物標志物可以直接指導臨床合理用藥和安全用藥，解決臨床上低水平、盲目性大、針對性不強的用藥模式，不僅可大大提高臨床用藥的效率，降低藥物毒副反應，還可避免對患者無意識的過度治療和無效藥物的重復治療，降低醫療費用。目前對于腫瘤(肺癌、結直腸癌、乳腺癌、淋巴瘤等癌癥)的基因多態性檢測，指導醫師“精確”用藥，產生了非常好的臨床效果。但在兒童患者中，鮮有關于基因導向指導個性化治療的相關產品。由于兒童患者中，藥物不良反應發生更加嚴重。因此，兒童患者更需要基因導向治療指導精準用藥的策略和產品。在兒童患者中開展以基因為導向的個體化藥物治療將有利于改善兒童患者的用藥安全性和有效性。這對提高兒童的健康水平、保障兒童健康成長、有效節約社會醫療成本、促進社會和諧與穩定具有重要意義，符合我國建設“健康中國”的重大戰略需求。

目前藥物基因組學檢測技術較多，均有不同的優缺點，很難在臨床上推廣應用。具體闡述如下：

一代測序：優勢：SNP分析金標準，既能發現已知SNP，也能發現未知SNP。劣勢：每個位點均需要經PCR擴增、跑膠，然后切膠純化，再測序。流程相對復雜，成本較高，工作量大，周期長，不適合大樣本多位點檢測。同時，一代測序僅能檢測頻率高于20％的SNP位點。

SNaPshot：優勢：類似LDR等多重引物單堿基延伸技術，可同時進行約10個位點PCR產物引物延伸，適合中低通量的SNP分型。劣勢：操作復雜，每個樣品的每個位點都需要PCR預先擴增，跑膠，DNA純化。對延伸引物要求極高，如每個引物有4-6個堿基差異，不能有互補區段，還要相同條件延伸，除廠家已經驗證的少數位點外，很難自己設計針對新位點的檢測。步驟分散，費時且易出錯，準確性不高。

焦磷酸測序：優勢：相對于SNaPshot，通量進一步增大，可以分析96個樣本的SNP，不需要制膠，不需要毛細管電泳，也不需要熒光染料和同位素。分析簡單，結果直觀。劣勢：價格昂貴。

Taqman探針技術：優勢：金標準，準確度高，適合樣本多、位點數量少的檢測。劣勢：價格昂貴(探針合成費用高)，僅檢測已知SNP位點，通量小，一般為少數幾個位點適用，對于樣本的質量要求較高，除了樣本無降解外，還需要濃度盡可能的一致，這樣結果才會比較集中。