[發明專利]在蛋白純化過程中滅活病毒的方法

有效

• 申請號: 201710252174.0
• 申請日: 2013-06-13
• 公開（公告）號: CN107188926B
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: A·克賽諾普洛斯
• 申請（專利權）人: EMD密理博公司
• 主分類號: C07K1/16
• 分類號: C07K1/16;C07K1/36;C12N7/00
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 黃歆;過曉東

1.一種滅活樣品中的一種或多種病毒的方法，其中所述方法包括在純化靶分子的過程期間，在所述樣品從第一單元操作流至第二單元操作時，利用一個或多個在線靜態混合器，連續地將所述樣品與一種或多種病毒滅活劑混合，其中所述樣品的流動在層流范圍中，其中在少于10分鐘內實現完全的病毒滅活，其中所述層流范圍包括低于100的Reynolds數，其中所述第一單元操作包括結合和洗脫色譜，所述第二單元操作包括流過純化方法，其中所述靶分子為抗體或包含Fc區的蛋白。

2.權利要求1的方法，其中在少于5分鐘內實現完全的病毒滅活。

3.權利要求1的方法，其中在少于2分鐘內實現完全的病毒滅活。

4.權利要求1的方法，其中在少于1分鐘內實現完全的病毒滅活。

5.權利要求1的方法，其中所述結合和洗脫色譜包括A蛋白親和色譜。

6.權利要求1的方法，其中所述流過純化方法包含兩種或更多種選自以下的基質：活性炭、陰離子交換色譜介質、陽離子交換色譜介質和病毒過濾介質。

7.權利要求1-4中任一項的方法，其中所述樣品包含A蛋白洗脫物。

8.權利要求1-4中任一項的方法，其中所述一種或多種病毒滅活劑選自酸、鹽和去污劑。

9. 一種滅活一種或多種病毒的方法，所述方法包括：(a) 使包含靶蛋白的樣品進行A蛋白親和色譜方法，從而獲得洗脫物；以及(b) 將所述洗脫物連續地轉移至在線靜態混合器以將一種或多種病毒滅活劑與所述洗脫物混合等于或少于10分鐘的一段時間，其中所述洗脫物的流動在層流范圍中，其中所述層流范圍包括低于100的Reynolds數，從而滅活一種或多種病毒，其中所述靶蛋白為抗體，其中所述方法還包括將來自步驟(b)的產出連續轉入流過純化加工步驟的步驟，其中述流過純化步驟包含兩種或更多種選自以下的基質：活性炭、陰離子交換介質、陽離子交換介質和病毒濾器。

10.權利要求9的方法，其中所述A蛋白親和色譜方法以分批模式進行。

11.權利要求9的方法，其中所述A蛋白親和色譜方法以連續模式進行。

12.權利要求11的方法，其中所述A蛋白親和色譜方法包括連續多柱色譜。

13.權利要求9的方法，其中所述一種或多種病毒滅活劑為酸。