[發明專利]一種ASE法萃取大青葉中靛玉紅的方法

在審

• 申請號: 201710249919.8
• 申請日: 2017-04-17
• 公開（公告）號: CN106841475A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 王麗麗;陳學松;歐妮;廖強;韋日偉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 蔡國

技術領域

本發明屬于靛玉紅的提取領域，尤其是一種ASE法萃取大青葉中靛玉紅的方法。

背景技術

《中國藥典》2015年版一部制備供試品方法：取本品細粉0.25g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小時，加熱回流提取至提取液無色?；厥杖軇┲粮?，殘渣加甲醇使溶解并轉移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

本發明對技術人員的專業水平要求較高，且回流時間較長。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種ASE法萃取大青葉中靛玉紅的方法，該方法萃取時間短，重復性好。

為了實現上述技術效果，本發明提供的技術方案是這樣的：、一種ASE法萃取大青葉靛玉紅的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：將大青葉樣品粉碎，過三號篩，取0.25g與0.3g硅藻土混合；

步驟2：將所得的混合物裝于放有濾膜的5ml ASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行；

步驟3：用50ml乙酸乙酯萃取，結束后，用甲醇將萃取液定容至50ml。

優選地，步驟3所述的萃取步驟參數為：萃取溫度為90℃，萃取時間為5min，循環次數為2次，沖洗體積為60％，吹掃時間為60。

本發明與傳統方法相比，具有以下優點：

本發明考察了乙酸乙酯、正己烷、乙酸乙酯：正已烷(1:1)、甲醇，結果表示，甲醇和乙酸乙酯提取效率基本一致，但甲醇提取的雜質峰較多，故本實驗采用乙酸乙酯為提取溶劑。

本發明采用3因素3水平正交試驗考察了對提取效率影響較大的三個因素：萃取溫度、靜態萃取時間、循環次數，通過實驗結果，結合極差分析，終確定較佳ASE參數為萃取溫度90℃，靜態萃取時間5min，循環次數2次。

附圖說明

圖1為以靛玉紅對照品

圖2為靛玉紅對照品溶液的色譜圖；

圖3為采用ASE法萃取所得的供試品溶液的色譜圖；

圖4為采用藥典方法提取所得的供試品溶液的色譜圖。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍內所做的有限次修改，仍在本發明的權利要求保護范圍內。

實施例1

1、儀器設備及試劑

1.1儀器：

電子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶劑萃取儀(美國DIONEX公司)、Thermo U3000 UHPLC液相色譜儀、安捷倫超高速液相色譜儀

1.2試劑：試劑與溶液(除特別注明外，本實驗所用試劑均為分析純)

水：符合GB/T 6682規定的一級水；

甲醇(CH₄O)：色譜純(液相色譜用)。

2、方法

2.1對照品溶液的制備：

取靛玉紅對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含2μg的溶液，即得。

2.2供試品溶液的制備

2.2.1《中國藥典》2015年版一部制備供試品方法：

取本品細粉0.25g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小時，加熱回流提取至提取液無色。回收溶劑至干，殘渣加甲醇使溶解并轉移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.2快速溶劑萃取法(ASE)制備供試品方法：

樣品經粉碎機粉碎，過三號篩，約0.25g，精密稱定，與0.3g硅藻土混合均勻，待用，移入到預先放好過濾膜的5ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結束后，把萃取液轉移于50ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，濾過，取續濾液，即得。

2.3 ASE萃取條件：萃取溶劑為乙酸乙酯，萃取溫度為90℃，萃取時間為5min，循環次數為2次，沖洗體積為60％，吹掃時間為60s。

2.4色譜條件與系統適用性試驗

a)儀器：Thermo雙三元液相(U-3000)、安捷倫1290超高速液相色譜儀；

b)色譜柱：Thermo Syncronis(C18 3μm 3×100mm)；

c)柱溫：40℃；

d)流速：0.5mL/min；

e)流動相：：甲醇-水(75:25)；

f)檢測波長：289nm；

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；理論板數按靛玉紅峰計算應不低于4000。

2.5測定法