[發(fā)明專利]度骨化醇注射液中含量的計(jì)算方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710248451.0
• 申請日: 2017-04-17
• 公開（公告）號: CN107064359B
• 公開（公告）日: 2019-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐詠群;黃錫偉;田欣欣;胡錚;婁媛媛
• 申請（專利權(quán)）人: 南京健友生化制藥股份有限公司;南京健友藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86;G01N30/06
• 代理公司: 南京思拓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種度骨化醇注射液中含量的計(jì)算方法，其特征在于包括如下步驟：

(A)取度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品和5,6-反式度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品，分別在溶劑中溶解成度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液和5,6-反式度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液并稀釋后，采用高效液相色譜法分別測定度骨化醇峰面積和5,6-反式度骨化醇峰面積，并計(jì)算度骨化醇的響應(yīng)因子和5,6-反式度骨化醇的響應(yīng)因子；

(B)取度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品，在溶劑中溶解成度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液后，加入氧氫化鈉，于70～85℃下進(jìn)行破壞反應(yīng)，反應(yīng)后將反應(yīng)液稀釋，采用高效液相色譜法分別測定反應(yīng)液中度骨化醇、度骨化醇前體和5,6-反式度骨化醇峰面積，分別計(jì)算度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞前的度骨化醇濃度、度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后余留的度骨化醇濃度、度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后生成的5,6-反式度骨化醇濃度，并計(jì)算度骨化醇前體的響應(yīng)因子和度骨化醇前體折算為度骨化醇的校正因子；

(C)將度骨化醇注射液和稀釋后的度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液采用高效液相色譜法，分別測定度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液中度骨化醇和度骨化醇前體的峰面積以及度骨化醇注射液中度骨化醇和度骨化醇前體的峰面積，由此計(jì)算度骨化醇注射液中的度骨化醇的有效濃度和度骨化醇注射液的有效含量；其中，度骨化醇注射液中的度骨化醇的有效濃度C注效和度骨化醇注射液的有效含量％注含的計(jì)算方法為：

C注效＝C標(biāo)效*(A度注+F校*A前注)/(A度標(biāo)+F校*A前標(biāo))；

％注含＝C注效/C樣稱*％樣含；

A度注：度骨化醇注射液中度骨化醇的峰面積；

F校：度骨化醇前體折算為度骨化醇的校正因子；

C標(biāo)效：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的度骨化醇的有效濃度；

A前注：度骨化醇注射液中度骨化醇前體的峰面積；

A度標(biāo)：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液中度骨化醇的峰面積；

A前標(biāo)：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液中度骨化醇前體的峰面積；

C樣稱：配制度骨化醇注射液時(shí)稱取量折算的度骨化醇濃度；

％樣含：配制注射液的度骨化醇原料藥含量；

步驟(A)、(B)或(C)中的液相色譜條件為：儀器：WATERS；色譜柱：Kinetex C18；檢測波長：275nm；流速：1.2ml/min；柱溫：30～35℃；運(yùn)行時(shí)間：55min；流動相A：乙腈或甲醇，流動相B：水；洗脫梯度：0～10min：75％A：25％B；10～30min：85％A：15％B；30～45min：0％A：100％B；45～55min：75％A：25％B。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(A)中，度骨化醇的響應(yīng)因子F度的計(jì)算方法為：

F度＝C度/A度；

C度：度骨化醇的濃度；

A度：度骨化醇的峰面積。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(A)中，5,6-反式度骨化醇的響應(yīng)因子F反的計(jì)算方法為：

F反＝C反/A反；

C反：5,6-反式度骨化醇的濃度；

A反：5,6-反式度骨化醇的峰面積。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(B)中，度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞前的度骨化醇濃度C度前、度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后余留的度骨化醇濃度C度后、度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后生成的5,6-反式度骨化醇濃度C反后、度骨化醇前體的響應(yīng)因子F前和度骨化醇前體折算為度骨化醇的校正因子F校的計(jì)算方法為：

C度前＝M稱*％標(biāo)含/V；

C度后＝F度*A度后；

C反后＝F反*A反后；

F前＝(C度前-C度后-C反后)/A前；

F校＝F前/F度；

M稱：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品的稱樣量；

％標(biāo)含：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品的含量；

V：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品的配液體積；

F度：度骨化醇度骨化醇的響應(yīng)因子；

F反：5,6-反式度骨化醇的響應(yīng)因子；

A度后：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后余留的度骨化醇峰面積；

A反后：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后生成的5,6-反式度骨化醇峰面積；

A前：度骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液破壞后生成的度骨化醇前體的峰面積。