[發明專利]一種林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物微膠囊的制備方法

在審

• 申請號: 201710242625.2
• 申請日: 2017-04-14
• 公開（公告）號: CN107048411A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 奚春宇;靳秋;劉于嘉;宋紅新;趙靜
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: A23L33/17
• 分類號: A23L33/17;A23L33/18;A23L33/16
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司22201
• 代理人: 王壽珍

1.一種林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物微膠囊的制備方法，其特征在于，采用銳孔凝固浴法，以林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物為芯材、海藻酸鈉為壁材；以吐溫80為乳化劑、氯化鈣溶液為凝固浴制備林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物微膠囊；

該方法至少包括以下步驟：

(1)林蛙膠原蛋白多肽的制備方法

取篩選得到的林蛙皮，以料液比為1:8-1:12的比例浸泡于蒸餾水中，室溫浸泡24h；加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為林蛙皮重量的1.5-3.0％，在40-60℃的恒溫條件下酶解反應5-6小時，調節酶解液pH值為7.5-10.0；對酶解液在100℃條件下滅酶10-15min；冷卻至室溫，6000-8000r/min離心15-25min，取上清液即得林蛙膠原蛋白多肽粗提液；通過凝膠層析法分離純化，再經真空冷凍干燥即得林蛙膠原蛋白多肽；

(2)林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物的制備方法

將干燥的林蛙膠原蛋白多肽與蒸餾水按質量比1:10-1:20加入到錐形瓶中，同時充分攪拌使其溶化；添加抗壞血酸到錐形瓶中，防止Fe²⁺氧化，抗壞血酸質量占林蛙膠原蛋白多肽溶液的1％-2％，攪拌使其溶解；再加入質量占林蛙膠原蛋白多肽溶液1％-2％的FeCl₂，用濃度為10％-15％的NaOH或HCl溶液調節其pH值為5.0-8.0；滴加結束后通過磁力攪拌在室溫下反應10-30min，使用離心機，在5000-8000r/min的條件下離心10-20分鐘；離心結束后，取上層清液用無水乙醇處理，反應液中迅速出現沉淀；靜置，過夜，使其完全沉淀；取沉淀物反復多次用無水乙醇處理，直至上層清液中無Fe³⁺/Fe²⁺檢出后，取沉淀物通過真空冷凍干燥，得無定型粉末，該物質即為林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物；

(3)林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物微膠囊的制備方法：

稱取海藻酸鈉，溶解于蒸餾水中，使得海藻酸鈉的濃度為1％-3％，在磁力攪拌器上進行加熱磁力攪拌，攪拌溫度為50-70℃，直至完全溶解；緩緩地向壁材溶液中加入1％-2％的吐溫80作為乳化劑，混合均勻后加入壁材溶液1％-3％的林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物，繼續攪拌直至混合均勻；稱取無水氯化鈣，溶解于蒸餾水中，使其濃度為2％-5％，攪拌均勻后制成凝固浴；最后，采用微膠囊造粒機，通過注射器將上述配置好的乳化液以液滴狀緩慢滴入凝固浴中，固化，清水洗滌3-5次，真空冷凍干燥24h后得到林蛙膠原蛋白多肽鐵復合物微膠囊。