[發明專利]抗樹鼩CD4分子單克隆抗體及分泌該抗體的雜交瘤細胞株與應用

有效

• 申請號: 201710242389.4
• 申請日: 2017-04-14
• 公開（公告）號: CN106995801B
• 公開（公告）日: 2020-03-20
• 發明（設計）人: 董少忠;張雪梅;徐靖雯;吳忠香;盧孔杰;代解杰;孫曉梅;宋杰;李慧;鞏蔚;嚴麗蔚;朱文兵
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫學生物學研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/28;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 陳左;于洪

本發明涉及一種抗樹鼩CD4分子單克隆抗體及分泌該抗體的雜交瘤細胞株與應用，屬于分子生物學技術領域。該雜交瘤細胞株保藏于中國典型培養物保藏中心建株，保藏名稱為雜交瘤細胞株TS?CD4?38，保藏號為CCTCC NO:C2016221，保藏地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學。其分泌的單克隆抗體具有效價高、特異性好、與天然抗原親和力強的優勢，可用于檢測天然樹鼩淋巴細胞表面分子CD4，具有較好的靈敏度和特異性。

技術領域

本發明屬于分子生物學技術領域，涉及一個單克隆抗體，具體涉及產生特異性抗樹鼩CD4分子抗體的雜交瘤細胞株和抗樹鼩CD4分子抗體，以及所述抗體的應用。

背景技術

樹鼩（tree shrew, Tupaia belangeri）是一種生活在熱帶和亞熱帶地區的哺乳綱攀鼩類的小型動物，形態酷似松鼠，是靈長類動物的近親。由于樹鼩具有體型小，經濟易得，易馴養，繁殖能力強，飼養管理成本低、對人類病毒易感等優點，常常用于替代或減少一些非人靈長類動物的使用，所以很早就被用作靈長類目（包括人類）的疾病動物模型。近年來研究發現，在丙型肝炎、乙型肝炎、手足口疾病、肝癌、糖尿病、腫瘤等疾病的研究中得到廣泛的應用。

CD4分子作為T細胞受體識別抗原復合物，在機體免疫系統的抗感染免疫中起著重要作用。CD4分子主要表達于輔助性T淋巴細胞(T helpercells, Th)的細胞膜上，其胞外區識別、結合主要組織相容性復合體II類分子，增強T細胞抗原受體(T cell receptor，TCR)與MHC分子結合的穩定性；胞內區增強白細胞CD3轉導的活化信號，從而參與并調節免疫系統的活化。CD4陽性淋巴細胞群的數量指標是衡量機體細胞免疫情況的重要指標。

但目前對樹鼩CD4分子方面的研究鮮有報道，且無可用的抗體來檢測樹鼩的CD4分子水平，對樹鼩動物模型通過淋巴細胞表面分子檢測分析其細胞免疫情況的評價尚屬空白，嚴重阻礙了對樹鼩這一動物模型的研究和應用。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有技術的不足，提供一種抗樹鼩CD4分子單克隆抗體及分泌該抗體的雜交瘤細胞株與應用，本發明的雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體具有效價高、特異性好、與天然抗原親和力強的優勢，可用于檢測天然樹鼩淋巴細胞表面CD4分子。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種分泌抗樹鼩CD4分子單克隆抗體的雜交瘤細胞株，保藏于中國典型培養物保藏中心建株，保藏名稱為雜交瘤細胞株TS-CD4-38，保藏號為CCTCC NO:C2016221，保藏地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學。

本發明還提供一種由上述雜交瘤細胞分泌的抗樹鼩CD4分子單克隆抗體。

本發明同時提供上述抗樹鼩CD4分子單克隆抗體在制備天然樹鼩淋巴細胞表面CD4分子檢測試劑或試劑盒中的應用。

進一步，本發明提供一種天然樹鼩淋巴細胞表面CD4分子的流式細胞分析（flowcytometry）檢測試劑盒，所述的試劑盒包括用多甲藻黃素葉綠素蛋白熒光染料（PerCP）標記的抗樹鼩CD4分子單克隆抗體。

進一步，本發明提供一種天然樹鼩淋巴細胞表面CD4分子的蛋白免疫印跡法（western-blot）檢測試劑，所述的試劑包括辣根過氧化物酶HRP標記的抗樹鼩CD4分子單克隆抗體。

本發明與現有技術相比，其有益效果為：

本發明的雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體具有效價高、特異性好、與天然抗原親和力強的優勢，可用于檢測天然樹鼩淋巴細胞表面CD4分子。