[發明專利]一種低污染制備茴香酸糖酯的方法及其抗菌應用

在審

• 申請號: 201710241415.1
• 申請日: 2017-04-13
• 公開（公告）號: CN106905385A
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發明（設計）人: 羊夢詩;李鑫
• 申請（專利權）人: 嘉興德揚生物科技有限公司
• 主分類號: C07H13/08
• 分類號: C07H13/08;C07H1/00;A61P31/04;A01P1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種低污染制備茴香酸糖酯的方法及其抗菌應用，其特征在于，包括如下步驟：

（1）取100 g干燥八角茴香果實研磨成60目的粉末，并放入2000 mL的揮發油提取器硬質圓底燒瓶中，隨后向圓底燒瓶中加入800 mL去離子水，浸泡1 h后，開始加熱升溫至80-90 ℃，在80-90 ℃保持2 h，茴香油伴隨部分水蒸氣進入揮發油提取器支管中；

（2）將揮發油提取器支管中收集的茴香油進行分液，除去大部分水，隨后向茴香油中加入1 g無水硫酸鎂，靜置20 min后，將混合溶液加熱至50 ℃，并趁熱用布氏漏斗進行抽濾來除去硫酸鎂，收集濾液，得到茴香油；

（3）取7.5 mL步驟（2）中所得茴香油，加入到50 mL的圓底燒瓶中，將圓底燒瓶置于磁力攪拌器中攪拌，隨后向圓底燒瓶中加入1 g氯化鐵，接著，將圓底燒瓶連接冷凝回流裝置并加熱升溫至90 ℃，同時在2 h內緩慢逐滴加完20 mL濃度為30%的過氧化氫溶液，之后繼續恒溫攪拌反應2 h；

（4）將上述反應液趁熱過濾，用10 mL 80-90℃的熱水洗滌3次，收集濾液并置于冰浴中，接著滴加5.6 mol/L的鹽酸將濾液的pH調節為1-3，接著，在冰浴中靜置2 h，抽濾，得到白色固體；

（5）將白色固體用乙醇-水重結晶，即將白色固體先溶于100 mL乙醇中并抽濾出去氧化錳和高錳酸鹽雜質，接著向濾液中加入300 mL去離子水，待有白色固體析出，再抽濾，干燥處理，得到白色針狀晶體，即為茴香酸；

（6）稱取2 g步驟（5）中所得茴香酸和1 g葡萄糖放入研缽中，隨后加入0.3 g磺酸型固體酸，并進行充分研磨，每隔1 h充分研磨一次，每次研磨30 min，總共研磨8次；

（7）將研磨后的混合物溶于20 mL的無水乙醇中，玻璃棒攪拌充分溶解，然后用布氏漏斗抽濾，濾渣為固體酸和多余葡萄糖，隨后利用旋轉蒸發儀將濾液中的無水乙醇蒸出，得到高純度的茴香酸糖酯；

（8）將0.5 mL金黃色葡萄球菌菌液或含有相同菌數的大腸桿菌菌液加入到裝有50 mL生理鹽水的三角瓶中，然后向三角瓶中加入用步驟（7）中所得茴香酸糖酯與無菌生理鹽水配置成的茴香酸糖酯懸液，將三角瓶置于恒溫培養箱中37 ℃培養12 h，隨后將懸液取出稀釋一定梯度后進行涂板，計數，并計算茴香酸糖酯的抑菌率。