[發明專利]一種ASE?HPLC法測定野菊花中蒙花苷含量的方法

在審

• 申請號: 201710238616.6
• 申請日: 2017-04-13
• 公開（公告）號: CN106872609A
• 公開（公告）日: 2017-06-20
• 發明（設計）人: 廖強;王麗麗;歐妮;陳江濤;陳學松
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 黃為

技術領域

本發明屬于化學檢測領域，尤其是一種ASE-HPLC法測定野菊花中蒙花苷含量的方法。

背景技術

本品為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的干燥頭狀花序。秋、冬二季花初開放時采摘，曬干，或蒸后曬干。本品呈類球形，直徑0.3～1cm，棕黃色?？偘?～5層苞片組成，外層苞片卵形或條形，外表面中部灰綠色或淺棕色，通常被白毛，邊緣膜質；內層苞片長橢圓形，膜質，外表面無毛?？偘坑械臍埩艨偦ü?。舌狀花1輪，黃色至棕黃色，皺縮卷曲；管狀花多數，深黃色，體輕，氣芳香，味苦。

藥典中記載的提取方法為：取本品粉末(過三號篩)約0.25g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈100ml，稱定重量，加熱回流3小時，放冷，再稱定重量，用乙腈補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得，并結合藥典記錄的測定方法進行測定。

上述野菊花中蒙花苷的含量的測定方法用時長，對操作人員要求高。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種萃取迅速、檢測精度高的ASE-HPLC法測定野菊花中蒙花苷含量的方法。

為了實現上述技術效果，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE-HPLC法測定野菊花中蒙花苷含量的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：將0.25g野菊花粉末與0.3g硅藻土混合均勻放入ASE萃取池；

步驟2：用甲醇萃取，并收集甲醇萃取液；

步驟3：采用HPLC法測定甲醇萃取液中的蒙花苷的含量。

優選地，所述的步驟1依次包括下述步驟：

步驟S1：將野菊花粉碎，過三號篩，取0.25g與0.3g硅藻土混合均勻；

步驟S2：將步驟1所得的混合物裝于放有濾膜的ASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行；

步驟S3：用甲醇萃取，并用甲醇定容至100ml，離心，取上清液。

優選地，步驟S2所述的ASE萃取池的體積為5ml。

優選地，步驟S3所述的離心參數為：速度為15000r/min，時間為5min。

優選地，步驟S3所述的萃取參數為：溫度為100℃，萃取時間為7min，循環次數為2次，沖洗體積為60％，吹掃時間為60s。

優選地，步驟2所述的HPLC法的檢測參數為：

色譜柱：Thermo Syncronis C18；

柱溫：40℃；

流速：0.5mL/min；

體積比等于26：24的甲醇：2％醋酸；

檢測波長：334nm。

優選地，所述的色譜柱的規格為3*100mm，3μm。

本發明與傳統方法相比，具有以下優點：

1、蒙花苷為黃酮類化合物，黃酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶劑，難溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有機溶劑。查看相關文獻，擬對80％甲醇、甲醇、乙醇進行提取溶劑的考察，評判的主要依據為提取率高低、雜質多少選出最佳溶劑。結果顯示乙醇提取率最大，依次到甲醇、80％甲醇。乙醇提取的樣品峰型差且雜質多。所以選擇甲醇作為提取溶劑。

2、實驗提取溶劑為甲醇，依據經驗，采用萃取溫度100℃、靜態萃取時間7min，利用單因素考察了循環次數1次、2次、3次，結果表明循環2次已能提取完全，因此本發明的循環次數為2次。

附圖說明

圖1為以蒙花苷對照品的濃度(ng)-平均峰面積進行線性回歸圖；

圖2為采用藥典方法提取所得的樣品色譜圖；

圖3為蒙花苷對照品色譜圖；

圖4為采用ASE法萃取所得的樣品色譜圖。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明的權利要求書做進一步說明，下述的實施例僅為本發明的較佳實施例，并不構成對本發明的任何限制。在本發明權利要求書的保護范圍所作出的任何修改、等同替換均屬于本發明所要保護的范圍內。

實施例1

1、儀器設備及試劑

1.1儀器：

電子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶劑萃取儀(美國DIONEX公司)、Thermo U3000UHPLC液相色譜儀、安捷倫1290高效液相色譜儀。

1.2試劑：

水：符合GB/T 6682規定的一級水；

甲醇(CH4O)：色譜純；

冰醋酸(CH3COOH)：分析純。

2、方法