[發明專利]一種定量組培苗硝酸鹽利用效率的方法

有效

• 申請號: 201710237317.0
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN107027626B
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 吳沿友;張開艷;吳沿勝;饒森;蘇躍;方蕾;李環;劉叢強;王世杰
• 申請（專利權）人: 中國科學院地球化學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;G06F17/11
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 劉艷

1.一種定量組培苗硝酸鹽利用效率的方法，其特征在于：包含以下步驟：

第一，通過組織培養獲得被考察植物的無性系組培苗；

第二，配置不同硝酸鹽濃度的培養基，測定用于配置上述培養基的硝酸鹽藥品的穩定氮同位素值δ¹⁵N_substrate；

第三，分別將無性系組培苗接種在上述不同硝酸鹽濃度的培養基中進行培養；

第四，分別取出經過上述培養的無性系組培苗的葉片，測定組培苗葉片的穩定氮同位素值δ¹⁵N_foliar；

第五，根據測定的組培苗葉片穩定同位素值δ¹⁵N_foliar，計算出各硝酸濃度梯度下的組培苗同位素同化比Ns；

第六，以酶動力學的米氏方程建立穩定氮同位素同化比與硝酸鹽濃度的關系模型；

第七，對上述模型求導，得出組培苗硝酸鹽利用效率方程；

第八，依據上述組培苗硝酸鹽利用效率方程，確定被考察的組培苗的硝酸鹽最大利用效率NUE_max；

第九，將被考察的培養基中硝酸鹽濃度作為C代入組培苗硝酸鹽利用效率方程中，可求出在被考察的硝酸鹽濃度下的組培苗硝酸鹽利用效率NUE；在第六步驟中，米氏方程的表達式為：這里的Ns為組培苗同位素同化比，C為培養基中硝酸鹽濃度，Ns_max和Km值為米氏方程的常數；在第七步驟中，組培苗硝酸鹽利用效率方程為這里的NUE為組培苗硝酸鹽利用效率，Ns'為Ns對C的求導；在第八步驟中，被考察的組培苗的硝酸鹽最大利用效率NUE_max為C＝0時的NUE,

2.根據權利要求1所述的一種定量組培苗硝酸鹽利用效率的方法，其特征在于：在第三步驟中，分別將帶有1個單芽的無性系組培苗接種在上述不同硝酸鹽濃度的培養基中，培養時間超過4周。

3.根據權利要求1所述的一種定量組培苗硝酸鹽利用效率的方法，其特征在于：在第四步驟中，分別取出100mg以上的上述經過4周以上培養的無性系組培苗的葉片，測定組培苗葉片的穩定氮同位素值δ¹⁵N_foliar。

4.根據權利要求1所述的一種定量組培苗硝酸鹽利用效率的方法，其特征在于：在第五步驟中，組培苗穩定氮同位素同化比Ns為組培苗葉片穩定氮同位素值δ¹⁵N_foliar與硝酸鹽的穩定氮同位素值δ¹⁵N_substrate的比值。