[發明專利]一種染黃羽鵪鶉腸道粘液細胞的Schiff氏法

在審

• 申請號: 201710236329.1
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN107014660A
• 公開（公告）日: 2017-08-04
• 發明（設計）人: 何敏;趙飄
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 北京彭麗芳知識產權代理有限公司11407
• 代理人: 彭麗芳

1.一種染黃羽鵪鶉腸道粘液細胞的Schiff氏法,其特征在于，包括如下步驟：

S1、稱取0.5g堿性品紅加入到100ml煮沸的蒸餾水中，輕微振蕩，繼續煮3min，充分溶解。然后冷卻致50℃時用濾紙過濾，濾液中加入10ml1mol/LHCl，冷卻致25℃時，加入0.5g偏重亞硫酸鈉(Na₂S₂O₅)，充分振蕩后，塞緊瓶塞，在室溫暗處靜置至少24h，待溶液紅色褪去，呈現無色或淡黃，然后加入0.5g活性碳，用力振蕩一分鐘，最后用粗濾紙過濾于，得Schiff染液，存于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑紙；

S2、選取鵪鶉十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結直腸中段1cm的組織樣，置于Bouin氏液中固定，常規石蠟切片至水洗；Schiff染液染40min，水洗10min；用蘇木精復染1min，分化，藍化；最后水洗、脫水、透明、封片。

2.如權利要求1所述的一種染黃羽鵪鶉腸道粘液細胞的Schiff氏法,其特征在于，所述常規石蠟切片至水洗具體包括如下步驟：

(1)將保存于75％酒精中的組織取出，進行修樣，沖洗；

(2)進行梯度酒精脫水：75％(4h)→85％(4h)→95％(2h)→100％I(1h)→100％II(1h)；

(3)將完成酒精脫水后的組織進行透明處理，二甲苯I(1h)→二甲苯Ⅱ(1h)，到透明程度為琥珀色時，終止透明；

(4)將完成透明處理后的組織置于60℃的苯蠟中，浸2h；

(5)包埋處理：先倒入液蠟，讓組織自然下沉；等蠟塊凝固；

(6)將修剪好的組織蠟塊固定到切片機上進行切片，切片厚度為4-6μm；將組織切片放入37℃烘箱，24h后取出，備用；

(7)脫蠟、復水：二甲苯I(10min)→二甲苯Ⅱ(10min)→100％酒精I(5min)→100％酒精Ⅱ(5min)→95％酒精(4min)→85％酒精(3min)→75％酒精(3min)，用水緩慢沖洗5min。

3.如權利要求2所述的一種染黃羽鵪鶉腸道粘液細胞的Schiff氏法,其特征在于，所述苯蠟包括50％的二甲苯、50％的蠟。