[發明專利]一種鴨特異性CpG寡脫氧核苷酸及其應用

有效

• 申請號: 201710236071.5
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN107099537B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 張琳;吳家強;李海燕;于森;黃艷艷;楊少華;黃慶華
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N15/117
• 分類號: C12N15/117;A61P31/14
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明針對目前預防和控制鴨病毒病，尤其是鴨坦布蘇病毒的發生和流行的藥物缺乏等問題，提供了一種起效快、作用范圍廣、可抑制鴨坦布蘇病毒（DTMUV）的鴨特異性CpG寡脫氧核苷酸（CpG ODN），以GACGTT為重復基序。本發明的鴨特異性CpG ODN比已知的鴨特異性CpG ODN活性更強，能夠有效抑制鴨坦布蘇病毒的復制，體外抑制率可達95%左右，為鴨坦布蘇病毒及其他鴨源病毒性疫病的治療提供了新的手段和依據。

技術領域

本發明涉及一種鴨特異性CpG ODN及其在制備鴨病毒病治療藥物中的應用，屬于獸醫藥領域。

背景技術

近年，鴨坦布蘇病毒（DTMUV）、禽流感、鴨瘟等鴨病毒病嚴重危害養鴨產業，給我國養鴨業造成了巨大的經濟損失。疫苗是預防和控制病毒性疫病強有力的手段，但在實際生產中，時常會出現免疫失敗或者在疫苗提供有效保護前就已發生感染的情況。所以迫切需要既能提高機體免疫力抑制病毒復制又能增強疫苗免疫效果的藥物來預防和控制鴨病毒性傳染病的發生和流行。

CpG寡脫氧核苷酸（CpG oligonucleotide，CpG ODN），是指含有非甲基化胞嘧啶(C)和鳥嘌呤(G)二核苷酸為核心序列的DNA或寡脫氧核苷酸序列，其基序為5′-RD-CpG-YY-3′，是DNA具備免疫刺激活性的結構基礎。CpG ODN被機體Toll樣受體（Toll-likereceptors，TLR）識別后能夠快速激活多種免疫細胞，作為免疫增強劑已得到廣泛驗證和應用。CpG ODN在激活先天性免疫、增強疫苗免疫效果、治療變態反應等方面均顯示出較廣闊的應用前景。

CpG ODN的免疫刺激作用具有種屬特異性，小鼠最佳刺激活性的基序是5’-GACGTT-3’，而人和雞的最佳刺激活性基序為5’GTCGTT3’。鴨的CpG ODN研究較少，已有的研究表明，含5’-GTCGTT-3’基序的分子也可有效刺激鴨免疫反應的產生，但5’-GACGTT-3’基序的活性更強。除種屬特異性外，CpG ODN存在構效關系，即結構影響活性，骨架結構（含CpG基序的數量及位置）、側翼序列、末端poly G修飾、連接序列均為分子活性的影響因素。目前，尚未見相關有效抑制病毒復制的鴨種屬特異性CpG ODN的研究。

發明內容

針對目前預防和控制鴨病毒病發生和流行的藥物缺乏等問題，本發明提供一種起效快、作用范圍廣、可增強疫苗免疫效果的鴨特異性CpG寡脫氧核苷酸（CpG ODN）。

本發明的另一目的是提供一種上述鴨特異性CpG ODN在制備治療鴨病毒病藥物中的應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。

一種鴨特異性CpG寡脫氧核苷酸（CpG ODN），包含GACGTT基序且含有8-24個核苷酸。

所述鴨特異性CpG ODN包括1-4個重復GACGTT基序，優選為3個重復。

所述鴨特異性CpG ODN重復基序之間無連接序列。

所述鴨特異性CpG ODN中的磷酸二酯鍵部分或全部被硫代磷酸酯鍵取代。

所述鴨特異性CpG-ODN的GACGTT基序不位于所述鴨特異性CpG ODN的5’端。

作為優選，所述鴨特異性CpG-ODN為SEQ ID NO. 1所示的核苷酸序列。

一種上述鴨特異性CpG ODN在制備治療鴨病毒病藥物中的應用。

上述治療鴨病毒病藥物為治療鴨坦布蘇病毒的藥物。

本發明具有以下優點：

本發明合成的鴨種屬特異性CpG ODN活性序列，比已知鴨特異性CpG ODN活性更強，能夠有效抑制鴨坦布蘇病毒的復制，體外抑制率可達95%左右，為DTMUV及其他鴨源病毒性疫病的治療提供了新的手段和依據。