[發明專利]基于輔酶A-Au（I）配位聚合物的電化學生物傳感器的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201710234471.2
• 申請日: 2017-03-29
• 公開（公告）號: CN107064259B
• 公開（公告）日: 2020-01-14
• 發明（設計）人: 胡宇芳;張青青
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于可模擬過氧化物酶性質的類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的電化學生物傳感器的制備方法，具體步驟如下：

(1)石墨烯的分散

將5.0～10.0mg石墨烯溶于5.0～10.0mL濃度為0.1～0.3M的pH＝5.0～6.0的醋酸緩沖液中，于超聲清洗器中超聲分散2～5h，得到石墨烯分散液；

(2)類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的制備

依次移取5.0～15.0μL濃度為30～80μM的HAuCl₄·3H₂O，5.0～15.0μL濃度為80～100μM的CoA溶液，70.0～90.0μL濃度為5～15mM pH為5.0～8.0的磷酸緩沖溶液于PCR管中，在20～30℃恒溫磁力攪拌機上震蕩反應約5～10min，反應液顏色由黃色變成無色，便得到類核酸CoA-Au(I)配位聚合物；

(3)電化學生物傳感器的制備

a.首先將玻碳電極GCE，直徑為3mm，在麂皮上用三氧化二鋁粉末，0.05μm，拋光2～5min，拋光后將電極置于超聲清洗器中用二次蒸餾水中超聲清洗2～5min，然后用N₂吹干，得到裸玻碳電極；

b.利用循環伏安法將氧化石墨烯電沉積到裸玻碳電極得到GO/GCE；在GO/GCE上滴加5.0～10.0μL CoA-Au(I)配位聚合物溶液，組裝10～20min后，用二次蒸餾水緩緩沖洗電極，得到基于可模擬過氧化物酶性質的類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的電化學生物傳感器CP/GO/GCE。

2.根據權利要求1所述的一種基于可模擬過氧化物酶性質的類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于：步驟(3)循環伏安法中電位控制在-1.5～0.5V，掃速為10mV/s。

3.一種利用權利要求1中所述的基于可模擬過氧化物酶性質的類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的電化學生物傳感器檢測過氧化氫的方法，其特征在于：利用循環伏安法，設置電位范圍為-1.2～0V，掃速為50mV/s，檢測CP/GO/GCE在濃度為100.0mM、pH＝7.4的PBS緩沖液中對H₂O₂的電化學響應，根據還原峰電流的大小確定其類核酸性質及過氧化物酶性質。

4.一種利用權利要求1中所述的基于可模擬過氧化物酶性質的類核酸CoA-Au(I)配位聚合物的電化學生物傳感器檢測過氧化氫的方法，其特征在于：利用計時電流法，檢測時間0～4300s，每隔100s加樣一次，檢測電位-0.3V，檢測CP/GO/GCE對不同濃度H₂O₂的電化學響應，獲得一系列不同濃度的H₂O₂對應的還原峰電流大小，建立電流響應與H₂O₂濃度之間的定量關系，根據兩者之間的定量關系，確定待測生物樣品中H₂O₂的含量。