[發明專利]一種ASE?HPLC法測定辛夷中木蘭脂素含量的方法

在審

• 申請號: 201710232457.9
• 申請日: 2017-04-11
• 公開（公告）號: CN106918665A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 廖強;王麗麗;陳江濤;韋日偉;陳學松
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 蔡國

技術領域

本發明屬于木蘭脂素的提取領域，尤其是一種ASE-HPLC法測定辛夷中木蘭脂素含量的方法。

背景技術

2015年版藥典方法中所記載的關于提取辛夷中木蘭脂素的方法為：取本品粗粉約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯20ml，稱定重量，浸泡30分鐘，超聲處理(功率250W，頻率33kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液3ml，加在中性氧化鋁柱(100～200目，2g，內徑為9mm，濕法裝柱，用乙酸乙酯5ml預洗)上，用甲醇15ml洗脫，收集洗脫液，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

該方法所需時間較長，而且對技術人員的專業要求較高。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種萃取時間短且重復性好的ASE法萃取辛夷中木蘭脂素的方法，本發明還提供了一種HPLC法檢測辛夷中木蘭脂素含量的方法。

為了實現上述技術效果，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE-HPLC法測定辛夷中木蘭脂素含量的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：采用ASE法用甲醇萃取辛夷粉末，并收集甲醇萃取液；

步驟2：采用HPLC法測定甲醇萃取液中的木蘭脂素的含量。

優選地，所述的步驟1具體包括下述子步驟：

步驟S1：將辛夷樣品粉碎，取1g與1g硅藻土混合均勻；

步驟S2：將步驟1所得的混合物裝于放有濾膜和3g中性氧化鋁的ASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行；

步驟S3：用甲醇萃取，結束后，用甲醇定容至50ml，搖勻、過濾，取濾液，即可。

優選地，步驟S3所述的萃取條件為：壓力為1500psi，溫度為100℃，時間為5min，次數為2次，沖洗體積為60％，吹掃時間為60s。

優選地，步驟S2所述的ASE萃取池體積為10ml。

優選地，步驟2所述的HPLC法的檢測參數為：

a)儀器：agilent1260超高效液相色譜儀；

b)色譜柱：Agilent ZORBAX Extend-C18，1.8μm，4.6×100mm；

c)柱溫：35℃；

d)流速：0.4mL/min；

e)流動相：體積比為35：1：64的乙腈-四氫呋喃-水；

f)檢測波長278nm；

理論板數按木蘭脂素峰計算應不低于9000。

本發明與傳統方法相比，具有下述優點：

1、本發明提高了溫度降低溶劑的黏度，減少了溶劑進入樣品基體的阻止，增加了溶劑進入樣品基體的擴散，降低溶劑和樣品基體之間的表面張力，使溶劑溶解待測物的容量增加；

2、由于液體對溶質的溶解能力遠大于氣體對溶質的溶解能力，故萃取液體的沸點隨壓力升高而提高，從而使溶劑在高溫高壓下仍保持在液態；

3、本發明考察了使用乙酸乙酯、甲醇作為提取溶劑，結果乙酸乙酯與甲醇的提取效果基本一致，由于乙酸乙酯提取后不能直接作為上HPLC的溶劑需要蒸干，故采用甲醇更方便，故采用甲醇作為提取溶劑；

4、本發明考察了加入1g、2g、3g的中性氧化鋁、不加入中性氧化鋁進行考察，結果RAD為1.18％，證明加入中性氧化鋁對其結果影響不大，但是又達到凈化效果，所以試驗過程中可以是用1g中性氧化鋁進行除雜。

附圖說明

圖1為以木蘭脂素對照品的濃度(mg)-峰面積進行線性回歸圖；

圖2為木蘭脂素對照品的色譜圖；

圖3為使用ASE法提取所得的木蘭脂素的色譜圖；

圖4為使用藥典方法提取所得的木蘭脂素的色譜圖；

圖5為加入凈化劑量的考察分析圖。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求書做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護的范圍內所做的有限次修改，仍在本發明的權利要求保護范圍內。

實施例1

1、儀器設備及試劑

1.1儀器：

電子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶劑萃取儀(美國DIONEX公司)、agilent1260超高效液相色譜儀。

1.2試劑：

水：符合GB/T 6682規定的一級水；

甲醇(CH₄O)：色譜純(液相色譜用)。

2、方法

2.1對照品溶液的制備：