[發明專利]數字聚合酶鏈式反應檢測芯片、方法及其液路系統

有效

• 申請號: 201710228631.2
• 申請日: 2017-04-10
• 公開（公告）號: CN107012079B
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 陳慶明;李冬梅;關國堅;林超
• 申請（專利權）人: 廣東順德墨賽生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/00;B01L3/00;C12Q1/686
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 葉丹丹;張春耀

本發明涉及一種數字聚合酶鏈式反應檢測芯片、方法及其液路系統。該聚合酶鏈式反應檢測芯片的液路系統包括第一連通閥、第二連通閥、第三連通閥、第一抽射管道、第二抽射管道、第一儲液管道、第二儲液管道、進樣管道、檢測管道、第一輸油管道及第二輸油管道，通過該第一抽射管道的一端用于連接第一抽射裝置，另一端連接該第一連通閥，該第二抽射管道的一端用于連接第二抽射裝置，另一端連接該第二連通閥；該第一儲液管道的一端連接該第一連通閥，另一端用于連接儲液裝置，該第二儲液管道的一端連接該儲液裝置，該第二儲液管道的另一端用于連接該第三連通閥。該聚合酶鏈式反應檢測芯片的液路系統中的管道結構簡單，易清洗。

技術領域

本發明涉及聚合酶鏈式反應檢測技術領域，特別是涉及一種數字聚合酶鏈式反應檢測芯片、方法及其液路系統。

背景技術

聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種體外擴增特定核酸的分子生物學技術，具有特異性強、靈敏度高、高效快捷、操作簡單等優點。其中，數字聚合酶鏈式反應(Digital Polymerase Chain Reaction，dPCR)是第三代PCR技術，數字聚合酶鏈式反應是將含有引物、模板、熒光探針及聚合酶等組份的PCR反應體系分成眾多微小的、獨立的反應單元。經過PCR擴增反應后，對每個反應單元的熒光信號進行檢測，有目標DNA片段的微滴在擴增后會發出較強熒光，即陽性微滴；無目標DNA片段的微滴在擴增后只有微弱的本底熒光，即陰性微滴；將陽性微滴記為1，陰性微滴則記為0，再根據泊松分布原理，計算得出目標DNA的起始拷貝數或濃度。

數字聚合酶鏈式反應中的樣品微滴的粒徑一般在100μm以下，如DNA樣本通常是從細胞或組織內提取，粒徑在50μm以下。樣品微滴在數字聚合酶鏈式反應檢測芯片中經過樣品準備、樣品進入、樣品檢測和管道清洗等流程。但是傳統的數字聚合酶鏈式反應檢測芯片中液路系統的管道設計不合理，樣品微滴在管道內損耗及死體積都比較嚴重，且當管道粘壁和動力不足時，樣品微滴在管道內的損耗會更加嚴重，進而導致樣品微滴的利用率低、損耗大，能夠分析檢測到的樣本量少。

此外，數字聚合酶鏈式反應檢測芯片對樣品微滴檢測分析完成后，以免對后續的檢測造成污染，需要對樣品微滴流經過的管道進行清洗，傳統數字聚合酶鏈式反應檢測芯片中液路系統的進樣管道內會存在死體積，較難清洗，易造成樣品微滴間的污染。

發明內容

基于此，有必要提供一種能夠保證樣品微滴逐個通過、易清洗、死體積小及樣品微滴利用率高的數字聚合酶鏈式反應檢測芯片、方法及其液路系統。

一種數字聚合酶鏈式反應檢測芯片的液路系統，包括第一連通閥、第二連通閥、第三連通閥、第一抽射管道、第二抽射管道、第一儲液管道、第二儲液管道、進樣管道、檢測管道、第一輸油管道及第二輸油管道；

所述第一抽射管道的一端用于連接第一抽射裝置，所述第一抽射管道的另一端連接所述第一連通閥，所述第二抽射管道的一端用于連接第二抽射裝置，所述第二抽射管道的另一端連接所述第二連通閥；

所述第一儲液管道的一端連接所述第一連通閥，所述第一儲液管道的另一端用于連接儲液裝置，所述第二儲液管道的一端用于連接所述儲液裝置，所述第二儲液管道的另一端連接所述第三連通閥；

所述進樣管道的一端連接所述第三連通閥，所述進樣管道的另一端用于連接供樣裝置；

所述檢測管道的一端連接所述第二連通閥，所述檢測管道的另一端連接所述第三連通閥及廢液回收裝置；

所述第一輸油管道的一端連接所述第一連通閥，所述第一輸油管道的另一端用于連接供油裝置；所述第二輸油管道的一端連接所述第二連通閥，所述第二輸油管道的另一端用于連接所述供油裝置。

在其中一個實施例中，所述第一連通閥、所述第二連通閥和所述第三連通閥均為三通閥。