[發(fā)明專利]數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片、方法及其液路系統(tǒng)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710228631.2
• 申請日: 2017-04-10
• 公開（公告）號: CN107012079B
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳慶明;李冬梅;關(guān)國堅;林超
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東順德墨賽生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/00;B01L3/00;C12Q1/686
• 代理公司: 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 葉丹丹;張春耀

本發(fā)明涉及一種數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片、方法及其液路系統(tǒng)。該聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片的液路系統(tǒng)包括第一連通閥、第二連通閥、第三連通閥、第一抽射管道、第二抽射管道、第一儲液管道、第二儲液管道、進樣管道、檢測管道、第一輸油管道及第二輸油管道，通過該第一抽射管道的一端用于連接第一抽射裝置，另一端連接該第一連通閥，該第二抽射管道的一端用于連接第二抽射裝置，另一端連接該第二連通閥；該第一儲液管道的一端連接該第一連通閥，另一端用于連接儲液裝置，該第二儲液管道的一端連接該儲液裝置，該第二儲液管道的另一端用于連接該第三連通閥。該聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片的液路系統(tǒng)中的管道結(jié)構(gòu)簡單，易清洗。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及聚合酶鏈式反應(yīng)檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片、方法及其液路系統(tǒng)。

背景技術(shù)

聚合酶鏈式反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種體外擴增特定核酸的分子生物學技術(shù)，具有特異性強、靈敏度高、高效快捷、操作簡單等優(yōu)點。其中，數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)(Digital Polymerase Chain Reaction，dPCR)是第三代PCR技術(shù)，數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)是將含有引物、模板、熒光探針及聚合酶等組份的PCR反應(yīng)體系分成眾多微小的、獨立的反應(yīng)單元。經(jīng)過PCR擴增反應(yīng)后，對每個反應(yīng)單元的熒光信號進行檢測，有目標DNA片段的微滴在擴增后會發(fā)出較強熒光，即陽性微滴；無目標DNA片段的微滴在擴增后只有微弱的本底熒光，即陰性微滴；將陽性微滴記為1，陰性微滴則記為0，再根據(jù)泊松分布原理，計算得出目標DNA的起始拷貝數(shù)或濃度。

數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)中的樣品微滴的粒徑一般在100μm以下，如DNA樣本通常是從細胞或組織內(nèi)提取，粒徑在50μm以下。樣品微滴在數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片中經(jīng)過樣品準備、樣品進入、樣品檢測和管道清洗等流程。但是傳統(tǒng)的數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片中液路系統(tǒng)的管道設(shè)計不合理，樣品微滴在管道內(nèi)損耗及死體積都比較嚴重，且當管道粘壁和動力不足時，樣品微滴在管道內(nèi)的損耗會更加嚴重，進而導(dǎo)致樣品微滴的利用率低、損耗大，能夠分析檢測到的樣本量少。

此外，數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片對樣品微滴檢測分析完成后，以免對后續(xù)的檢測造成污染，需要對樣品微滴流經(jīng)過的管道進行清洗，傳統(tǒng)數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片中液路系統(tǒng)的進樣管道內(nèi)會存在死體積，較難清洗，易造成樣品微滴間的污染。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要提供一種能夠保證樣品微滴逐個通過、易清洗、死體積小及樣品微滴利用率高的數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片、方法及其液路系統(tǒng)。

一種數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)檢測芯片的液路系統(tǒng)，包括第一連通閥、第二連通閥、第三連通閥、第一抽射管道、第二抽射管道、第一儲液管道、第二儲液管道、進樣管道、檢測管道、第一輸油管道及第二輸油管道；

所述第一抽射管道的一端用于連接第一抽射裝置，所述第一抽射管道的另一端連接所述第一連通閥，所述第二抽射管道的一端用于連接第二抽射裝置，所述第二抽射管道的另一端連接所述第二連通閥；

所述第一儲液管道的一端連接所述第一連通閥，所述第一儲液管道的另一端用于連接儲液裝置，所述第二儲液管道的一端用于連接所述儲液裝置，所述第二儲液管道的另一端連接所述第三連通閥；

所述進樣管道的一端連接所述第三連通閥，所述進樣管道的另一端用于連接供樣裝置；

所述檢測管道的一端連接所述第二連通閥，所述檢測管道的另一端連接所述第三連通閥及廢液回收裝置；

所述第一輸油管道的一端連接所述第一連通閥，所述第一輸油管道的另一端用于連接供油裝置；所述第二輸油管道的一端連接所述第二連通閥，所述第二輸油管道的另一端用于連接所述供油裝置。

在其中一個實施例中，所述第一連通閥、所述第二連通閥和所述第三連通閥均為三通閥。