[發(fā)明專利]冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710228521.6 | 申請(qǐng)日： | 2017-04-10 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN106834144A | 公開（公告）日： | 2017-06-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 趙楠 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 成都圖徑生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/14 | 分類號(hào)： | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙)51124 | 代理人： | 梁鑫,高蕓 |
| 地址： | 610000 四川省成都*** | 國(guó)省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 冬蟲夏草 原生 質(zhì)體 制備 方法 | ||
1.冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
a、菌絲的培養(yǎng)與純化
取冬蟲夏草菌絲體，接種于液體培養(yǎng)基上，于10～25℃，50～200rpm轉(zhuǎn)速下培養(yǎng)5～9天，用濾紙過濾，沉淀用0.3～0.6mol/L氯化鉀溶液洗滌2～3次，收集得到純化后的菌絲體；
b、原生質(zhì)體的制備
向步驟a得到的冬蟲夏草菌絲體中加入復(fù)合酶液，于20～35℃下間斷混合酶解4～6h；所述復(fù)合酶液為以0.55～0.65mol/L氯化鉀溶液作為緩沖試劑，配制的溶壁酶和纖維素酶終濃度分別為1.8～2.2％和0.8～1.2％的混合液體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟a中所述的液體培養(yǎng)基組成為：每升培養(yǎng)基含葡萄糖5～30g，酵母粉5～20g，蛋白胨4～20g，磷酸二氫鉀0.25～5g，硫酸鎂0.25～5g，余量為水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟b中所述復(fù)合酶液為以0.6mol/L氯化鉀溶液作為緩沖試劑，配制的溶壁酶和纖維素酶終濃度分別為2％和1％的混合液體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟b中所述冬蟲夏草菌絲體與復(fù)合酶液的添加量為：每500mg菌絲體中加入0.5～3ml復(fù)合酶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟b中所述冬蟲夏草菌絲體與復(fù)合酶液的添加量為：每500mg菌絲體中加入1ml復(fù)合酶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：所述的間斷混合酶解是指酶解過程中，每隔20～30min顛倒混勻一次。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草原生質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟b中加入復(fù)合酶液后，于26℃下間斷混合酶解6h。
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