[發明專利]一種基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法

有效

• 申請號: 201710227963.9
• 申請日: 2017-04-10
• 公開（公告）號: CN107132208B
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 趙一雷;梁波;宣黎明;孔令印;劉國寧
• 申請（專利權）人: 蘇州貝康醫療器械有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 陳靜

1.一種基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)細胞培養液的采集：取經細胞培養一段時間的細胞培養液；

(2)拉曼光譜信號的采集：使用拉曼光譜技術測量步驟(1)所得細胞培養液中代謝產物的原始拉曼光譜信號；判斷原始拉曼光譜信號是否合格，是則進入步驟(3)，否則，重復對該細胞培養液進行拉曼光譜技術測量；

(3)拉曼光譜信號的處理：對步驟(2)獲取的合格原始拉曼光譜信號進行數據信號處理，得到可分析信號,具體處理方法如下：

(3.1)對獲取的原始拉曼光譜信號進行數據校正；

利用最小二乘算法，通過最小化誤差的平方和尋找數據的最佳函數匹配，最佳函數匹配通過讓采樣點跟擬合曲線的距離平方和最小實現數據校正；

(3.2)將經數據校正后的信號進行去除熒光信號背景；

a.利用墨西哥帽小波為母函數的連續小波模式匹配方法準確確定峰位置；

b.繼續利用以Haar小波為母函數的連續小波求導方法確定峰的起始位置；

c.利用懲罰最小二乘法擬合出平滑可調背景；

(3.3)對去除熒光信號背景的信號進行均一化處理；

基于Stouffer's Z-score算法對去除熒光信號背景的信號進行均一化處理，得到可分析信號；

(4)拉曼光譜信號的分析：對步驟(3)得到的可分析信號進行差異統計分析得到差異信號，利用差異信號建模，并利用支持向量機對差異信號進行分類，對正常和異常的細胞培養液光譜信號進行區分，得到細胞培養液質量結果。

2.根據權利要求1所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(1)中所取的細胞培養液為7微升。

3.根據權利要求2所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述7微升細胞培養液放置在微量溶液檢測池中。

4.根據權利要求3所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述微量溶液檢測池包括半球面反射鏡，或者由半球面反射鏡和圓柱面反射鏡構成反射鏡組，所述半球面反射鏡和反射鏡組都具有高反射的鏡面。

5.根據權利要求4所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述鏡面鍍介質膜或惰性金屬膜。

6.根據權利要求1所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(1)中一段時間為3-4天。

7.根據權利要求1所述的基于拉曼光譜測量的細胞培養液質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)判斷原始拉曼光譜信號是否合格標準為：0.5％的乙醇溶液在880cm^-1處散射峰絕對峰強CV≤5％，拉曼位移波動范圍≤2cm^-1。