[發明專利]一種高脂血癥模型的造模方法

在審

• 申請號: 201710223891.0
• 申請日: 2017-04-07
• 公開（公告）號: CN107148941A
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發明（設計）人: 李玉;王一君;吳金節;陶煥青;宛曉春
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K50/40
• 代理公司: 合肥鼎途知識產權代理事務所(普通合伙)34122
• 代理人: 葉丹

技術領域

本發明涉及醫藥領域，具體是一種高脂血癥模型的造模方法。

背景技術

高脂血癥是動脈粥樣硬化、心臟病、中風和脂肪肝等疾病的主要誘發因素之一，嚴重威脅著人們的健康。為探究高脂血癥防治方法，建立良好的高脂血癥實驗動物模型是必不可少的。實驗動物模型在科學實驗和藥物研發中占有重要地位，造模成功與否直接影響整個實驗的準確性和代表性。但由于實驗指標、實驗條件和實驗經費等因素的制約，在選擇動物模型時就要對不同動物以及不同的造模方法進行取舍，根據實驗目的找到最合適的動物模型。在高脂血癥模型中，大鼠、小鼠應用比較廣泛，但是其血漿中運輸膽固醇的主要載體是高密度脂蛋白膽固醇，而人類血漿運輸膽固醇的主要載體是低密度脂蛋白膽固醇；而豚鼠、金黃地鼠、長爪沙鼠雖然在實驗應用方面相對較少，但其脂類代謝方式與人類更為相似。

現有的高脂血癥造模方法主要有單純高脂乳劑灌胃法，高脂、高糖、高蛋白乳劑灌胃法，高糖飲食造模法，進食后給予高脂高糖飼料造模法，這些方法主要集中在肝內脂肪酸的合成、氧化與輸出的不平衡方面。此外，應用藥物或毒物誘導模型等方法，對動物的刺激較大，動物處于應激狀態，影響試驗結果，且此法不是正常高脂血癥發生的常見原因，與人類高脂血癥的病理生理特點相差甚遠。理想的造模方法，應該具有造模方法簡單，與人體發病機理相近，可重復率高等特點。

發明內容

本發明的一種高脂血癥模型的造模方法，應用改良的高脂飼料飼喂法，符合自然高脂血癥發病的情況，以期達到造模效果確實、模型穩定、可重復性強和研究人高脂血癥提供合適的模型的目的。

本發明的一種高脂血癥模型的造模方法，包括以下步驟：

步驟一，取體重相近、胎次一致的幼犬，公母隨機，自由飲水進食，正常飼喂1周后，飼喂高脂日糧造模，每日兩次喂食；

所述高脂日糧包括：74％基礎飼料、10％豬油、5％蔗糖、5％成人奶粉、5％蛋黃粉和1％膽固醇；

步驟二，在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，分別稱重，觀察犬的體重變化；

步驟三，在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，每只犬分別采集血清，測量血清TG、TC、高密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量；采集全血，測量血液流變學指標；

于造模第84天，抽取每只犬抗凝血，測量血液流變學指標；并隨機選取三只犬，進行宰殺，取肝臟組織，進行組織病理學超微結構觀察，測量指標全部滿足TC≥7.8mmol/L，TG顯著高于正常組，血液流變學指標出現變化，血液粘稠，肝臟中有較多的脂滴蓄積，確定為高脂血癥模型。

優選的，飼喂高脂日糧造模，每日兩次喂食，每只犬日攝入高脂日糧的最初量為100g，每日遞增5g。

本發明的優點在于：

本試驗造模出來的實驗犬在血液常規指標的基礎上，通過電鏡等微觀指標檢測高脂模型成功后，實驗犬的變化，更加準確。

本發明中的方法具有造模方法簡單，與人體發病機理相近，可重復率高等特點，這些方面主要基于犬的生理與人的生理的相近性，以及病理的相似性。

具體實施例

以下結合具體實施例對本發明作進一步說明：

實施案例1

配制高脂日糧，按以下百分比配制：74％基礎飼料、10％豬油、5％蔗糖、5％成年奶粉、5％蛋黃粉和1％膽固醇，混勻，待用；

取體重相近、胎次一致的幼犬40只，公母隨機，自由飲水進食，飼喂于18～22℃明暗各12h的動物實驗室內，正常飼喂1周后，隨機分為2組，其中30只飼喂高脂日糧造模，另外10只飼喂正常日糧，每日兩次喂食。

為了更好的達到造模效果，飼喂高脂日糧造模，每日兩次喂食，每只犬日攝入高脂日糧的最初量為100g，每日遞增5g。

在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，分別稱重，觀察犬的體重變化；并從每只犬的前肢靜脈采血，取血清，測量TG、TC、LDL-C和高HDL-C含量；測量血液流變學指標；

于造模第84天，抽取每只犬抗凝血，測量血液流變學指標；并隨機選取三只犬，進行宰殺，取肝臟組織，進行組織病理學超微結構觀察，測量指標全部滿足TG≥1.68mmol/L、TG顯著高于正常組，血液流變學指標出現變化，血液粘稠，肝臟中有較多的脂滴蓄積，確定為高脂血癥模型。

造模組和正常組飼喂的時間、次數和攝入量均相同，也根據科學飼養方法的數據來進行造模實驗。

實施案例2