[發明專利]一種用于鑒別蠟楊梅雌雄的分子標記、引物對及其應用

有效

• 申請號: 201710221205.6
• 申請日: 2017-04-06
• 公開（公告）號: CN108085405B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 高中山;賈慧敏;王妍;趙海波;汪國云;焦云;柴春燕
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 沈自軍

本發明公開了一種用于鑒別蠟楊梅雌雄的分子標記、引物對及其應用。所述分子標記，為蠟楊梅雌性特異的基因片段MC?FT1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。所述引物對，包括上游引物和下游引物，核苷酸序列為：上游引物：5′?GGATCCTGATGCGCCCAGTCC?3′；下游引物：5′?GAAAAGATCGATTTGATAC?3′。利用本發明引物對進行PCR鑒定蠟楊梅性別，對蠟楊梅的幼苗鑒定，盡早排除雄株，有效降低蠟楊梅雄株對人們健康的威脅，同時能避免栽培楊梅受到蠟楊梅花粉的影響，優化栽培楊梅的生長環境，以保證其果實質量和商品價值。

技術領域

本發明涉及分子鑒別技術領域，特別是涉及一種用于鑒別蠟楊梅雌雄的分子標記、引物對及其應用。

背景技術

蠟楊梅(Myrica cerifera L.或者Morella cerifera)屬于楊梅科楊梅屬植物，原產于美國海濱地區，是常綠灌木或小喬木，高2-3m，為雌雄異株植物。葉片蠟質，葉被充滿黃色腺孔，具有濃烈香氣；雌花為葇荑花序，自3月下旬至4月上旬開放，4月上旬為盛花期，花期約30天，雄花為復葇荑花序，自3月下旬至4月下旬陸續開放，4月中旬為盛花期，花期約50天，比楊梅花期略晚；果實藍色，外被蠟質層，直徑3mm左右，冬季不落。蠟楊梅為濱海植物，喜光，具有一定的耐鹽堿、耐寒、耐水濕的能力，適生于沿海地區和灘涂地，目前，蠟楊梅在浙江余姚，慈溪等地均有栽培，生長旺盛，綠化效果好。

楊梅(Myrica rubra Sieb.Zucc.)屬于楊梅科楊梅屬植物，原產于我國東南各省及云貴高原，栽培歷史悠久，是我國南方的特色水果，目前楊梅主栽品種分布在我國浙江，江蘇、福建、江西、湖南、廣東、貴州和云南等省，其中浙江省的栽培面積、產量、質地等均為最佳。楊梅果實成熟期(6月份)恰逢一年中的水果淡季，能夠有效填補市場上的水果空缺期，再加上楊梅果色艷麗，風味獨特，同時富含花青苷，具有較高的營養價值，深受消費者的喜愛。

楊梅喜土質疏松、排水良好、富含石礫的土層深厚的土壤，不適宜在偏鹽堿的灘涂地生長。有研究證明，以蠟楊梅為砧木，荸薺、東魁、晚稻楊梅為接穗，成活率均大于90％，使得這些栽培楊梅能夠充分利用土地資源，逐漸形成沿海經濟林樹種，將綠化與生產有機結合在一起，具有較大的經濟效益。

不過，蠟楊梅為雌雄異株植物，雄株花期比較長，花粉大量產生，其花粉能不能使栽培楊梅正常結實。此外，部分人群對蠟楊梅的花粉存在過敏現象，所以在生產上引種時應盡量避免雄株的產生，減少潛在的過敏原。開發一種方法，在蠟楊梅幼期快速鑒別其雌雄，從而盡早排除雄株，有效降低蠟楊梅雄株對人們健康的威脅，同時能避免栽培楊梅受到蠟楊梅花粉的影響，優化栽培楊梅的生長環境，以保證其果實質量和商品價值。

發明內容

本發明針對現有技術中缺乏有效手段對蠟楊梅進行早期性別鑒定，提供了一種用于鑒別蠟楊梅雌雄的分子標記，以及基于該分子標記設計的一種引物對，利用該引物對能夠有效地對蠟楊梅植株進行早期性別鑒定。

一種用于鑒別蠟楊梅雌雄的分子標記，為蠟楊梅雌性特異的基因MC-FT1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

引物對，包括上游引物和下游引物，核苷酸序列為：

上游引物：5′-GGATCCTGATGCGCCCAGTCC-3′；

下游引物：5′-GAAAAGATCGATTTGATAC-3′。

本發明又提供了所述引物對在鑒別蠟楊梅性別中的應用。

所述蠟楊梅為蠟楊梅幼苗。

本發明又提供了所述引物對在制備用于鑒別蠟楊梅性別的試劑盒中的應用。

本發明還提供了一種包含所述引物對的試劑盒。

本發明還提供了所述試劑盒在鑒別蠟楊梅性別中的應用。