[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)阿司匹林和硝酸甘油精準(zhǔn)用藥的方法及專用引物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710217302.8
• 申請(qǐng)日: 2017-04-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106947815B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李愛(ài)娟;謝文博;趙菁
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 李愛(ài)娟
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883
• 代理公司: 北京邦申誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11871
• 代理人: 簡(jiǎn)德明

本發(fā)明公開(kāi)了一種用于檢測(cè)阿司匹林和硝酸甘油精準(zhǔn)用藥的方法及專用引物。本發(fā)明提供了一種檢測(cè)阿司匹林和硝酸甘油抗藥性SNP位點(diǎn)的專用引物，包括引物組1和引物組2；所述引物組1由引物對(duì)1、引物對(duì)2、引物對(duì)3和引物對(duì)4組成；所述引物組2由單鏈延伸引物1、單鏈延伸引物2、單鏈延伸引物3和單鏈延伸引物4組成；本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明了，本發(fā)明高效一次性實(shí)驗(yàn)完成與阿司匹林和硝酸甘油抵抗相關(guān)的多個(gè)SNP位點(diǎn)檢測(cè)，一次性實(shí)驗(yàn)完成阿司匹林和硝酸甘油的精準(zhǔn)用藥基因檢測(cè)，減少實(shí)驗(yàn)成本；本發(fā)明對(duì)于指導(dǎo)阿司匹林和硝酸甘油的臨床精準(zhǔn)用藥具有非常高的應(yīng)用價(jià)值，適于推廣應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于檢測(cè)阿司匹林和硝酸甘油精準(zhǔn)用藥的方法及專用引物。

背景技術(shù)

精準(zhǔn)用藥是精準(zhǔn)醫(yī)療的重要組成部分。遺傳藥理學(xué)和藥物基因組學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)，不同患者攜帶的基因(如藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因、藥物代謝酶基因、DNA修復(fù)基因)單核苷酸多態(tài)性不同，對(duì)藥物的反應(yīng)不同，同一藥物對(duì)不同患者的療效作用也有很大的差異，因此，從藥物療效的角度出發(fā)，進(jìn)行基因檢測(cè)指導(dǎo)精準(zhǔn)用藥，幫助醫(yī)生篩選出有效的治療方案，對(duì)病人做出最正確的治療決策，既節(jié)省了患者無(wú)效的醫(yī)療費(fèi)用，而且提高了治療效果。

阿司匹林是臨床上常用的預(yù)防和治療動(dòng)脈血栓性疾病類的基礎(chǔ)藥物，硝酸甘油是臨床上常用的心腦血管急救藥物。然而，在臨床上，存在阿司匹林抵抗現(xiàn)象，即阿司匹林并非對(duì)所有的血栓患者都有效果，部分患者即使服用阿司匹林也不能抑制血小板聚集和預(yù)防血栓形成，從而達(dá)不到臨床治療效果。硝酸甘油使用無(wú)效現(xiàn)象在臨床上也非常常見(jiàn)，即人們?cè)谛枰本鹊奈＜睍r(shí)刻，即使?fàn)幏謯Z秒服用的硝酸甘油，也不能挽救生命。阿司匹林抵抗現(xiàn)象、硝酸甘油使用無(wú)效現(xiàn)象與基因多態(tài)性密切相關(guān)。

傳統(tǒng)的檢測(cè)方法主要采用sanger測(cè)序，熒光定量PCR等方法。以上方法雖然也可能在臨床上提供較好的價(jià)值，但是存在費(fèi)時(shí)、經(jīng)濟(jì)成本高、時(shí)間成本高等原因，未能在臨床上大規(guī)模推廣使用。

基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)，具有兼容性強(qiáng)、通量高、精準(zhǔn)度高、性價(jià)比高的優(yōu)點(diǎn)，可用于同時(shí)檢測(cè)阿司匹林抵抗、硝酸甘油抵抗的精準(zhǔn)用藥相關(guān)基因信息。目前尚未有將基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)技術(shù)應(yīng)用于阿司匹林抵抗、硝酸甘油抵抗的精準(zhǔn)用藥基因檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)阿司匹林和硝酸甘油抗藥性SNP位點(diǎn)的專用引物。

本發(fā)明提供的專用引物，包括引物組1和引物組2；

所述引物組1由引物對(duì)1、引物對(duì)2、引物對(duì)3和引物對(duì)4組成；

所述引物對(duì)1由序列1所示的單鏈DNA分子和序列2所示的單鏈DNA分子組成；

所述引物對(duì)2由序列3所示的單鏈DNA分子和序列4所示的單鏈DNA分子組成；

所述引物對(duì)3由序列5所示的單鏈DNA分子和序列6所示的單鏈DNA分子組成；

所述引物對(duì)4由序列7所示的單鏈DNA分子和序列8所示的單鏈DNA分子組成；

所述引物組2由單鏈延伸引物1、單鏈延伸引物2、單鏈延伸引物3和單鏈延伸引物4組成；

所述單鏈延伸引物1的核苷酸序列為序列9；

所述單鏈延伸引物2的核苷酸序列為序列10；

所述單鏈延伸引物3的核苷酸序列為序列11；

所述單鏈延伸引物4的核苷酸序列為序列12。

上述專用引物中，

所述引物對(duì)1、引物對(duì)2、引物對(duì)3和引物對(duì)4中的各條引物的摩爾比為等摩爾比；