[發(fā)明專利]Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗、其制備方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710216710.1 | 申請日： | 2017-04-05 |
| 公開（公告）號： | CN106946995B | 公開（公告）日： | 2019-12-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 曹文龍;滕小锘;張大鶴;易小萍 | 申請（專利權(quán)）人： | 蘇州米迪生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/866;C12N15/66;C12N5/10;A61K39/235;A61P31/20 |
| 代理公司： | 32256 南京利豐知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) | 代理人： | 王鋒<國際申請>=<國際公布>=<進入國 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市工業(yè)*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 抗原蛋白 禽腺病毒 血清4型 基因工程亞單位疫苗 疫苗 包涵體肝炎 雞心 免疫性 致病性 積液 制備 感染 預(yù)防 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了一種Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗、其制備方法及應(yīng)用。所述疫苗所含抗原蛋白的序列如SEQ ID NO:1所示，該抗原蛋白具有安全性好、免疫性強，對雞等動物沒有致病性等優(yōu)點。本發(fā)明的疫苗對Ⅰ群血清4型禽腺病毒感染導(dǎo)致的雞心包積液綜合癥以及包涵體肝炎等病癥具有很好的預(yù)防作用。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明具體涉及一種Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗、其制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)
I群禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirusgroup I serum type 4，F(xiàn)AV-4)，歸屬腺病毒A群。Ⅰ群禽腺病毒粒子呈球形，直徑為70～90nm，無囊膜，呈20面體對稱，有12個頂點，由20個正三角形組成的正20面體。表面由252個長10～11nm、寬5～6nm的中空顆粒組成，中間有直徑60～65nm長的髓芯。其核酸是雙股線狀DNA，在細胞核內(nèi)復(fù)制，分子量為3×107Da，其占整個病毒粒子的11.2％～13.5％，剩余部分是蛋白質(zhì)，五鄰體，六鄰體是FAD的主要結(jié)構(gòu)蛋白它們共同構(gòu)成病毒核衣殼。
1987年巴基斯坦臨近卡拉奇的安哥拉首次報道了由FAV-4引起的心包積水肝炎綜合征(Hydropericardium hepatitissyndrome，HHS)大暴發(fā)，隨后在厄瓜多爾智利伊拉克墨西哥印度孟加拉等地相繼暴發(fā)，并造成巨大的經(jīng)濟損失，F(xiàn)AV-4具有明顯的致病年齡段，對雛雞的致病力最強，可通過接觸水平傳播及垂直傳播。主要病變?yōu)樾陌环e有清亮或淡黃色的水樣或果凍狀液體，偶見肝臟有局灶性壞死或褪色，肝細胞出現(xiàn)嗜堿性包涵體，至死率高。但目前國內(nèi)尚無商品化FAV-4疫苗，I群禽腺病毒的防控仍較薄弱。通過對I群禽腺病毒的流行病學調(diào)查,該病在我國雞群中發(fā)病率較高,且呈逐年上升趨勢。發(fā)病的宿主范圍越來越廣,白羽肉雞、肉種雞、蛋雞、黃羽雞均可感染發(fā)病。特別是2010年以后發(fā)病呈現(xiàn)增加趨勢,在全國范圍內(nèi)均有流行。臨床表現(xiàn)包涵體肝炎(IBH)、心包積水肝炎綜合征(HHS)。隨著我國養(yǎng)雞業(yè)的迅速發(fā)展，I群禽腺病毒的發(fā)病率給飼養(yǎng)業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。關(guān)于該病的防治，目前國內(nèi)尚無可以預(yù)防I群禽腺病毒的商品化疫苗，導(dǎo)致I群禽腺病毒防控存在漏洞。
CN106075427A公開了一種Ⅰ型禽腺病毒疫苗、蛋黃抗體的制備方法，其主要是通過將分離的FAV病毒接種到雞胚肝細胞中繁殖，然后收獲病毒并滅活制備疫苗，該FAV疫苗是滅活病毒苗，而且雞胚肝細胞培養(yǎng)非常困難，故而難以推廣應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的在于提供一種Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗、其制備方法及應(yīng)用，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。
為實現(xiàn)前述發(fā)明目的的不足，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括：
本發(fā)明實施例提供了一種可溶性融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
本發(fā)明實施例還提供了一種編碼所述可溶性融合蛋白的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
本發(fā)明實施例還提供了包含所述基因的重組桿狀病毒載體。
進一步，所述的重組桿狀病毒載體主要是通過在桿狀病毒的PH和/或P10啟動子下插入所述的基因而形成。
本發(fā)明實施例還提供了導(dǎo)入所述重組桿狀病毒載體的宿主細胞。
優(yōu)選的，所述宿主細胞選自昆蟲細胞系，例如Sf9、High Five、S2、Sf21等，且不限于此。
本發(fā)明實施例還提供了所述可溶性融合蛋白、所述基因或者所述重組桿狀病毒載體在制備Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗中的應(yīng)用。
本發(fā)明實施例還提供了Ⅰ群血清4型禽腺病毒基因工程亞單位疫苗，其包含所述的可溶性融合蛋白。
進一步的，所述疫苗包含濃度為50ug/ml～100ug/ml可溶性融合蛋白。
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