[發明專利]一種治療自身免疫病的病毒載體及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 201710214232.0
• 申請日: 2017-04-01
• 公開（公告）號: CN107119074B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 趙子建;畢欣耘;李曉曦;李芳紅;林艷
• 申請（專利權）人: 廣州華真醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N15/864;C12N15/66;C12N7/04;A61K48/00;A61K9/00;A61P3/10;A61P37/02;A61P29/00;A61P19/02
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 李紅團

本發明公開了一種治療自身免疫病及糖尿病的病毒載體及其構建方法和應用，所述病毒載體為克隆有mfat?1基因的慢病毒表達質粒或克隆有mfat?1基因的腺相關病毒表達質粒，所述的mfat?1基因如SEQ ID No.:1所示。本發明所述的病毒載體可以用于制備治療免疫失衡導致的相關自身免疫病以及糖尿病的生物藥物，如以病毒載體轉染至細胞中的病毒顆粒是一種安全無毒具備抗炎活性的新型生物藥物，以慢病毒(lentivirus)和腺相關病毒(AAV)為載體，利用基因重組技術高表達mfat?1基因，具有顯著的抵抗Th細胞分化失衡和炎癥的作用，能滿足臨床使用需求，制備方法簡單，容易操作，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明涉及糖尿病和免疫失衡誘發的自身免疫疾病治療藥物，具體涉及一種治療自身免疫病的病毒載體及其構建方法和應用。

背景技術

T淋巴細胞介導的細胞免疫是人體免疫應答的中心環節。其中，CD4⁺ T細胞分化失衡導致的免疫紊亂和炎癥與多種自身免疫疾病及神經退行性疾病的相關性獲得科學家持續關注，并且部分機理得以闡明。CD4⁺T細胞在不同轉錄因子調控下可分化為Th1、Th2、Treg和Th17，并通過其所分泌的細胞因子相互制約，處于動態平衡狀態。研究表明，細胞亞群Th1/Th2細胞及Th17/Treg細胞之間的失衡與多種自身免疫疾病密切相關，尤其是1型糖尿病（Type1 diabetes, T1D），類風濕性關節炎（Rheumatoid arthritis，RA），多發性硬化癥（Multiple sclerosis，MS），系統性紅斑狼瘡（Systematic lupus erythematosus，SLE）等。

1型糖尿病稱為胰島素依賴型糖尿病（insulin-dependent diabetes mellitus,IDDM），為一種常見的器官特異性自身免疫性疾病，是嚴重危及兒童和青少年健康的慢性疾病之一。據美國糖尿病協會的評估, 大約5% 的糖尿病人為1 型糖尿病，且多數于兒童或青年時期發病。在兒童及青少年患者中，T1DM 所占比例約為80-90%。此外，尚有一類緩慢發病的成人隱匿性自身免疫糖尿病（Latent Autoimmune Diabetes in Adults，LADA），在病因上亦屬于自身免疫性T1DM，但由于患者起病年齡及臨床表現均與2型糖尿病類似，易被誤診。我國1型糖尿病患者的絕對數已超過100萬。1型糖尿病發病的整個過程中伴隨一系列炎癥和免疫紊亂的發生，主要表現為自身反應性T細胞對胰島b細胞的攻擊以及自身抗體的產生引起胰島b細胞功能衰竭、壞死，導致胰島素分泌的絕對不足，如治療不善將發生嚴重的并發癥，如失明、腎衰竭、心臟病、截肢等。

2型糖尿病稱為非胰島素依賴型（noninsulin-dependent diabetes mellitus,NIDDM），占糖尿病中的絕大多數。不同程度的胰島素缺乏和組織的胰島素抵抗聯合作用是引起2型糖尿病的主要發病機制。一旦2型糖尿病被確診，胰島b細胞功能進行性降低，肝臟葡萄糖生成和釋放增多，引起血糖升高。

無論是1型還是2型糖尿病，自然病程都包括以下三個階段：1. 高血糖前期，此期可長達10年左右。1型糖尿病已存在b細胞免疫性破壞，其主要標志是出現GAD或ICA等自身抗體。2型糖尿病在此期間無特定的血清學標志，但常伴有高胰島素血癥及腹型肥胖等胰島素抵抗綜合征，胰島功能顯示糖耐量減低（impaired glucose tolerance，IGT）及（或）空腹血糖受損（Impaired fasting glucose, IFG）。2. 高血糖期空腹及餐后血糖達到糖尿病的診斷標準。3. 慢性并發癥期。