[發明專利]一種維藥恰麻古多糖及其提取方法和應用有效
| 申請號: | 201710210598.0 | 申請日: | 2017-03-31 |
| 公開(公告)號: | CN107011453B | 公開(公告)日: | 2019-04-19 |
| 發明(設計)人: | 海力茜·陶爾大洪;董彩霞;陳卓爾;熱孜亞木·吾甫爾;李金芳;侯寶林;古娜娜·對山別克;阿依夏古麗·巴卡斯 | 申請(專利權)人: | 新疆醫科大學 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;A61K31/715;A61P37/04 |
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| 地址: | 830018 新疆維吾爾*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 維藥恰麻古 多糖 及其 提取 方法 應用 | ||
1.一種維藥恰麻古多糖,其特征在于,所述恰麻古多糖BRNP-1和BRNP-2結構式分別如下:
。
2.如權利要求1所述的一種維藥恰麻古多糖提取方法,其特征在于,所述恰麻古多糖提取包括下列步驟:
(1)取恰麻古干燥藥材,加入3倍量體積的石油醚,60℃連續回流脫脂2h,藥渣過濾后,晾干備用,濾液回收;
(2)取脫脂后的恰麻古藥材,加入30倍質量的水,90℃-100℃連續回流提取3次,每次2h,合并三次提取液,過濾后,濾液濃縮至總量的20%,加入無水乙醇至濃縮濾液的體積分數濃度為80%,放至4℃過夜;
(3)抽濾步驟(2)過夜溶液后收集沉淀,加入10-30倍質量的蒸餾水重新溶解,室溫下充分攪拌,使其溶解完全,將樣品溶液裝入7000Da-8000Da分子量的透析袋,用蒸餾水透析后,收集袋內溶液,濃縮凍干后,得到恰麻古粗多糖;
(4)按質量份數計,取恰麻古粗多糖3份,用0.01份-0.1份蒸餾水充分溶解后,4000r·min-1,15min離心除去不溶于水的雜質,沉淀收集保存;
(5)另將上清液,上樣至已裝填平衡完全的陰離子交換柱,分別用H2O、0.5mol/L NaCl、1.0mol/L NaCl、2.0mol/L NaCl和0.2mol/L NaOH洗脫,硫酸苯酚法檢測,分段收集含糖部分的洗脫液,得到BRN、BRA1、BRA2、BRA3、BRA45個組分;
(6)分別將5個組分濃縮,冷凍干燥,按質量份數計,取BRN 300份-500份,加入0.01倍-0.1倍純水,室溫下充分溶解,4500r·min-1,20min離心2次,取上清液,上樣至已裝填平衡完全的凝膠色譜柱,用0.1mol/LNaCl洗脫,按每管15mL收集洗脫液,硫酸苯酚法檢測,收集至無糖檢出;
(7)按照洗脫曲線合并、濃縮、透析、冷凍干燥得到BRN-1和BRN-2;
(8)按質量份數計,分別取BRN-1和BRN-2150份,加入0.05倍-0.1倍純水,4500r·min-1,20min離心2次,取上清液,上樣至已裝填平衡完全的凝膠色譜柱,用0.1mol/LNaCl洗脫,按每管10mL收集洗脫液,硫酸苯酚法檢測,收集至無糖檢出,BRN-1得到兩個部分,分別為BRN-1a和BRN-1b;BRN-2得到兩個組分,分別為BRN-2a和BRN-2b,取BRN-1a和BRN-2b濃縮后,冷凍干燥,分別標號為BRNP-1和BRNP-2,稱重,分別置于干燥器中保存,備用。
3.如權利要求2所述的一種維藥恰麻古多糖提取方法,其特征在于,所述步驟(2)用90℃水連續回流提取3次。
4.如權利要求2所述的一種維藥恰麻古多糖提取方法,其特征在于,所述步驟(3)用7000Da分子量的透析袋。
5.如權利要求2所述的一種維藥恰麻古多糖提取方法,所述步驟(6)取BRN500份,加入0.03倍純水,室溫下充分溶解,4500r·min-1,20min離心2次,取上清液。
6.如權利要求2所述的一種維藥恰麻古多糖提取方法,其特征在于,所述提取方法提取的多糖BRNP-1和BRNP-2的總糖含量為100%。
7.如權利要求1所述的一種維藥恰麻古多糖在制備提高免疫力藥物中的應用。
8.如權利要求7所述的一種維藥恰麻古多糖在制備提高免疫力藥物中的應用,其特征在于,BRNP-1給藥濃度為400μg·mL-1。
9.如權利要求8所述的一種維藥恰麻古多糖在制備提高免疫力藥物中的應用,其特征在于,BRNP-2給藥濃度為400μg·mL-1。
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