[發明專利]基于兩性離子聚甲基丙烯基半胱氨酸修飾的表面等離子共振儀芯片的制備方法

有效

• 申請號: 201710209598.9
• 申請日: 2017-03-31
• 公開（公告）號: CN107064072B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 丁利;蘇榮欣;葉慧君;王利兵;齊崴;王季誠
• 申請（專利權）人: 丁利;蘇榮欣;葉慧君;王利兵;齊崴;王季誠
• 主分類號: G01N21/552
• 分類號: G01N21/552
• 代理公司: 天津創智天誠知識產權代理事務所(普通合伙) 12214
• 代理人: 陳昌娟

1.一種基于兩性離子聚甲基丙烯基半胱氨酸修飾的表面等離子共振儀芯片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

a)裸金芯片制備

采用電子束蒸發鍍膜技術在基底上涂覆一層2-3nm厚的鉻層，在該鉻層上涂覆一層45-50nm厚的金膜，得到裸金芯片；

b)裸金芯片預處理

將步驟a)獲得的裸金芯片浸入食人魚洗液中，常溫下浸泡1-3h，取出用去離子水清洗3次后用氮氣吹干；

c)兩性離子甲基丙烯基半胱氨酸單體的合成

將24.98mmol半胱氨酸用20mL去離子水溶解后，向其中加入27.47mmol 2-丙烯酸-2-羥基-1,3-丙二酯以及29.4μmol二甲苯基磷，于20-30℃下攪拌反應2-4h，反應后的溶液用乙酸乙酯萃取一次，二氯甲烷萃取兩次，凍干后得到白色粉末狀的兩性離子甲基丙烯基半胱氨酸單體；

d)裸金芯片表面多巴胺聚合

用pH＝8.5的三羥甲基氨基甲烷緩沖液配制1-3mg/mL多巴胺溶液，將b)步驟得到的裸金芯片浸入其中，于40-60℃下孵育1-2h，取出用去離子水清洗3次后用氮氣吹干；

e)聚多巴胺芯片表面溴代異丁酰溴引發劑修飾

將d)步驟得到的芯片的基底浸入20ml含有1.0ml三乙胺的二氯甲烷中，在冰浴且攪拌條件下逐滴加入10ml含有0.9ml溴代異丁酰溴的二氯甲烷，室溫下攪拌反應12-24h，取出用乙醇和去離子水依次清洗3次后用氮氣吹干；

f)裸金芯片表面聚甲基丙烯基半胱氨酸合成

將e)步驟得到的芯片放入預先三次循環脫氣并充氮氣的施倫克瓶中；將c)步驟得到的5mmol單體溶解于4ml去離子水中，用氮氣脫氣10-30min，向其中加入0.5mmol聯吡啶、0.167mmol溴化亞銅和0.083mmol溴化銅，用氮氣脫氣10-30min后用超聲處理5-10min，將得到的溶液移入施倫克瓶，使得溶液將瓶中的芯片浸沒，于氮氣條件下反應2-4h后取出芯片，用乙醇和去離子水依次清洗3次后用氮氣吹干。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的基底為玻璃片基底或光纖基底。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的金膜還可為銀膜或銀/金復合膜。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述食人魚洗液為98wt.％濃硫酸與30wt.％雙氧水的混合溶液，濃硫酸與雙氧水的體積比為7:3。