[發明專利]可傳代培養的羊睪丸傳代細胞及其傳代馴化培養方法及專用培養體系與應用有效
| 申請號： | 201710208123.8 | 申請日： | 2017-03-31 |
| 公開（公告）號： | CN107058212B | 公開（公告）日： | 2021-03-19 |
| 發明（設計）人： | 路榮;劉國英;范秀麗;張燕紅;高艷華 | 申請（專利權）人： | 金宇保靈生物藥品有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322 | 代理人： | 魯兵 |
| 地址： | 010030 內蒙古*** | 國省代碼： | 內蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 傳代 培養 睪丸 細胞 及其 馴化 方法 專用 體系 應用 | ||
【權利要求書】：
1.羊睪丸傳代細胞LT-1，保藏編號為CGMCC No.12988，保藏日期為2016年9月7日，保藏地址為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，北京市朝陽區北辰西路1號院3號。
2.用權利要求1所述的羊睪丸傳代細胞LT-1CGMCC No.12988增殖培養羊口瘡病毒的方法，包括以下步驟：用含有V/V為5％的胎牛血清和V/V為5％的新生牛血清的DMEM培養液的細胞培養液Ⅲ培養羊睪丸傳代細胞LT-1CGMCC No.12988，培養溫度為36.5-37.5℃，待其長滿單層細胞后，傾去培養液上清，以V/V為1％-3％的劑量接入羊口瘡病毒，吸附1小時后，加入含V/V為2％的胎牛血清的DMEM培養液的維持液Ⅰ，維持液Ⅰ的添加量為8-10mL，置于恒溫培養箱中培養，培養溫度為36.5-37.5℃，觀察單層細胞的病變情況，當80％以上單層細胞出現病變時，將單層細胞凍融2-3次，收獲病毒液。
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