[發明專利]內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產方法及其應用

在審

• 申請號: 201710206879.9
• 申請日: 2017-03-31
• 公開（公告）號: CN106811434A
• 公開（公告）日: 2017-06-09
• 發明（設計）人: 楊成德;陳秀蓉;薛莉;牛小麗
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心62100
• 代理人: 張克勤,田玉蘭

技術領域

本發明屬于微生物領域，具體涉及一種內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產方法及其應用。

背景技術

進入21世紀后，基于化學農藥對環境的污染和農藥殘留等問題，隨著“公共植保，綠色植保”理念的提出和實踐，生物農藥研發成為我國生物產業、農業科研與應用的熱點，被列為國家中長期科技發展規劃的重大研究領域與方向，綠色植保已經成為國家發展的重要需求與必然趨勢。其中尤以植物內生細菌作為拮抗菌的研究得到眾多學者的關注。植物內生細菌是指生活在植物體內，但對植物沒有任何實質性傷害的細菌，其通過固氮、溶磷和產IAA等生物學功能提高宿主的抗旱和抗寒等抗逆能力，特別是抑菌功能是其成為生防菌資源的有力支撐。

植物內生細菌也可以通過分泌抑菌物質、與病原菌競爭營養空間及誘導植物獲得抗病性阻止或降低病原菌對植物的侵染或造成的危害。以內生細菌為菌種資源研制的微生物農藥不易產生抗藥性，不傷害天敵，且能利用農副產品等廣泛生產，更重要的是內生細菌可以定殖于作物體內，甚至可以通過種子(苗木)傳播于下一代，長期起作用，省時省力，高效，應用于農業生產后為生產綠色或無公害農產品提供了一個新的途徑。特別是生物農藥多利用農副產品或農業廢棄物等發酵生產，一方面生產的生物農藥應用于農業，減少化學農藥的負面問題，提高農產品產量和品質，另一方面綜合利用農副產品及農業廢棄物，提高其附加值。

微生物肥料作為一種新型肥料，施入土壤后，通過其特定菌株的快速繁殖，能固定大氣中的氮素、釋放土壤中固定態的磷、鉀元素，使得環境的養分潛力得以充分發揮，并為作物生長營造一個良好的土壤微生物環境，在減少化肥用量、降低環境污染、提高農作物品質等方面具有重要意義。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解鉀和作物生長素于一身的復合微生物肥料的研發，在農業可持續發展中有舉足輕重的作用。

黃瓜、西瓜、甜瓜和辣椒等植物的枯萎病發生普遍，給農業生產中帶大巨大的經濟損失，而且該病的病原菌在土壤中可以長期存活，一般化學農藥進入土壤后受土壤理化性質影響效果較差，而效果較好的農藥又殘效期長，影響農產品農藥殘留量和質量安全，在目前國家提出“減藥減肥”的大方針下，尋找化學農藥的替代品是當務之急，而微生物農藥和微生物肥料則是可選項之一。

CN104152385A公開了一株莫哈韋芽孢桿菌菌株、微生物菌劑及其制備方法和應用，公開了莫哈韋芽孢桿菌對馬鈴薯壞疽病菌等的抑制率及對馬鈴薯的促生效果，特別是報道了莫哈韋芽孢桿菌的液體發酵條件。但液體發酵菌液存在貯存困難、不易運輸和二次發酵等問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產方法，以解決現有液體發酵菌液存在貯存困難、不易運輸和二次發酵的問題。

本發明的另一個目的是提供一種內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的應用。

本發明提供的技術方案為：一種內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產方法，包括如下步驟：將內生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus mojavensis)菌株接入至固體基質中發酵,接入量為4-12％，pH值為7.0-8.0,發酵時間為30-42h，發酵溫度為34-42℃。

優選地，內生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus mojavensis)菌株的接入量為8％，pH值為7.5,發酵時間為36h，發酵溫度為38℃。

優選地，麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、稻殼粉20.9％、玉米面17.9％、豆粕13.4％、葡萄糖20g/kg、脲10g/kg、硫酸亞鐵15g/kg，料:水＝1:1.2。

優選地，內生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus mojavensis)菌體的活菌數為3.61×10¹²CFU/mL-3.43×10¹³CFU/mL。

優選地，內生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus mojavensis)菌體的活菌數為3.43×10¹³CFU/mL。

上述內生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑在防治黃瓜枯萎病和辣椒枯萎病中的應用。

本發明高寒草地牧草內生細菌莫哈韋芽孢桿菌采用CN104152385A公開的莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus mojavensis)QLY002，CGMCC No.8905。

本發明利用農業廢棄物固體發酵的微生物菌劑易于貯存和運輸，且使用方便，優點明顯。