[發明專利]與CD56分子特異性結合的多肽及其應用

有效

• 申請號: 201710206120.0
• 申請日: 2017-03-30
• 公開（公告）號: CN107236025B
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發明（設計）人: 張雁;黃鴻興;趙龍;汪華
• 申請（專利權）人: 中山大學;廣州一代醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C12N5/0783;C12N5/079;C12N5/0793;C12N5/09;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 曹愛紅;廖曉霞

本發明提供與CD56分子特異性結合的多肽及其應用，所述多肽選自7號多肽、8號多肽中的至少一種，所述7號多肽、8號多肽的氨基酸序列分別如序列表中序列1、序列2所示。本發明提供的多肽能與CD56分子特異性結合，可以用人工合成或基因工程的方法生產。與抗體比較，本發明提供的多肽具有易于制備，分子量小，不易產生免疫排斥反應等特點；且毒副作用小，與CD56+細胞的結合，對目標細胞沒有明顯的殺傷和抑制增殖的效果。本發明提供的多肽可用于作為CD56陽性表達細胞的標記物，也可作為免疫熒光CD56抗體的代替物等。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及能與CD56分子特異性結合的多肽及其應用。

背景技術

CD56分子，又叫神經細胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)，是免疫球蛋白超家族的一個成員。CD56是一個含有多肽鏈的糖蛋白，CD56分子的胞外部分包括5個Ig樣的結構域和2個Ⅲ型纖粘蛋白樣結構域。由于其mRNA的不同剪接方式，最后生成3種不同的分子亞型：1.120kDa亞型，由GPI(glycosyl-phosphatidylinositol)錨定在細胞膜上，主要表達于正常組織和分化良好的組織，如NK細胞，神經組織，神經-肌肉連接處，神經內分泌組織，內分泌組織等。2.140kDa和180kDa亞型，包含一個跨膜結構域，主要表達于未分化組織或惡性腫瘤細胞上，如神經外胚層來源的腫瘤(如視網膜母細胞瘤、星形細胞瘤、神經母細胞瘤等)、內分泌腫瘤、小細胞肺癌，NK/T細胞淋巴瘤/白血病、多發性骨髓瘤和急性髓系白血病等。因此，CD56已經被用于NK細胞和上述腫瘤細胞的標志物，可用于細胞標記、分選和腫瘤分子診斷。

CD56分子不僅在細胞粘附中起機械的錨定作用，還是細胞表面一個重要的受體，調節細胞內的下游信號通路。文獻中報道已發現的配體包括：CD56分子(同種結合)，L1-CAM，FGFR，GNDF，GFRα，細胞外基質成分如CSPG，SHPG，膠原蛋白，肝素等。研究發現，CD56在神經系統的分化過程和突觸的可塑性中具有重要作用，并且利用下游的信號傳導可以抑制星形膠質細胞和神經凸起伸長前體細胞的增殖，更為重要的是，CD56下游信號可以影響惡性腫瘤細胞的生物活性，并且CD56失表達與一些惡性腫瘤轉移潛能和預后差密切相關。因此，CD56分子的配體(如抗體等)可以作為一種潛在的抑制劑來抑制腫瘤生長。

目前，在以CD56分子為靶標的腫瘤治療的研究中都涉及到CD56抗體，以往的鼠源性抗體在臨床治療中會產生人抗鼠抗體反應(human anti-mouse antibodies,HAMA)，導致治療性抗體在體內作用時間縮短，減弱其抗腫瘤的作用，以及可能引起身體上的其他副作用。有研究者采用基因工程的方法來改造鼠源性抗體，來減弱HAMA反應。但是單純的抗CD56抗體的治療作用并不十分理想，進而有研究利用抗CD56抗體作為一個靶向運輸的分子，聯合放射性同位素、細胞毒性藥物、細胞因子、雙效價抗體(能同時結合腫瘤細胞表面的腫瘤相關抗原和免疫細胞表面的激活分子)等，增強對腫瘤細胞的殺傷作用。因此，在腫瘤免疫治療的臨床應用中的關鍵是找到與CD56分子結合的高度特異性抗體。

發明內容

本發明為彌補現有技術的不足，提供一種能與CD56分子特異性結合的多肽，其具有易于制備，分子量小，應用安全性高等特點。

本發明為達到其目的，采用的技術方案如下：提供與CD56分子特異性結合的多肽，所述多肽包括7號多肽、8號多肽中的至少一種，所述7號多肽、8號多肽的氨基酸序列分別如序列表中序列1、序列2所示。

本發明提供的多肽能與CD56分子特異性結合，可以用人工合成或基因工程的方法生產。該多肽亦可稱之為一種非抗體結合蛋白(non-antibody binding protein)，非抗體結合蛋白是相對于抗體/抗原特異性結合的特征而言，又稱之為支架結合蛋白(scaffoldsbinding protein)。這類蛋白在三維結構上通過其表面氨基酸形成的支架能結合特定的分子，與抗體比較，具有分子量小，滲透力強，耐熱，穩定性好，容易操作和適合大規模生產等特點。