[發(fā)明專利]一種含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠、制備方法和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710199767.5 | 申請(qǐng)日： | 2017-03-29 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107022090B | 公開（公告）日： | 2019-04-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蒲洋;李文軍;唐志紅;秦松 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 魯東大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C08J3/075 | 分類號(hào)： | C08J3/075;C08L33/26;C08L89/00;C08K9/04;C08K7/24;H01G9/20 |
| 代理公司： | 北京中濟(jì)緯天專利代理有限公司 11429 | 代理人： | 楊樂(lè) |
| 地址： | 264025 山東*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 含有 蛋白 復(fù)合 凝膠 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠，其特征在于，所述復(fù)合凝膠為藻紅蛋白/膠原蛋白/羧基化碳納米管/聚丙烯酰胺復(fù)合凝膠，并且所述復(fù)合凝膠的制備方法，包括以下步驟：
(1)提取膠原蛋白并配制濃度為5～9mg/mL的膠原蛋白水溶液；
(2)配制濃度為10mg/mL的羧基化碳納米管溶液；
(3)配制濃度為0.05～0.3g/mL的交聯(lián)劑溶液；所述交聯(lián)劑溶液的配制方法為：將丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺溶于pH值為6.8、濃度為0.5mol/L的Tris/HCL緩沖液中，過(guò)濾后得到濃度為0.3g/mL的交聯(lián)劑溶液；所述丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺的摩爾比為60～75：1，所述丙烯酰胺和所述Tris/HCl緩沖液的摩爾比為8：1；
(4)提取藻紅蛋白并且配制不同濃度的藻紅蛋白溶液；
將所述膠原蛋白水溶液、所述羧基化碳納米管溶液和所述交聯(lián)劑溶液按照體積比為1：1：2.5的比例混合均勻，室溫下超聲，密閉抽氣，然后分別加入體積分?jǐn)?shù)為0.2～1％的TEMED溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10～50mg/mL的過(guò)硫酸銨溶液，發(fā)生聚合反應(yīng)，得到膠原蛋白/羧基化碳納米管/聚丙烯酰胺復(fù)合水凝膠；所述TEMED溶液和過(guò)硫酸銨溶液之和與所述膠原蛋白水溶液的體積比為5～10：1；
將所述膠原蛋白/羧基化碳納米管/聚丙烯酰胺復(fù)合水凝膠加入至所述藻紅蛋白溶液中，加入EDC和NHS，在室溫下避光反應(yīng)過(guò)夜，用去離子水沖洗，去除未交聯(lián)的藻紅蛋白，得到藻紅蛋白/膠原蛋白/羧基化碳納米管/聚丙烯酰胺復(fù)合凝膠，所述EDC和NHS用量之和與所述藻紅蛋白的摩爾比為1：2～4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠，其特征在于，所述提取膠原蛋白并配制成膠原蛋白水溶液的方法為：
將魚皮加入濃度為0.1mol/L的NaOH水溶液中浸泡24h以除去非膠原成分，得到脫脂魚皮；
將所述脫脂魚皮水洗至中性后加入濃度為0.5mol/L的醋酸溶液，勻漿，4℃磁力攪拌萃取2d，在轉(zhuǎn)速為10000r/min的條件下離心30min，得到的上清液為酸溶性膠原蛋白；
向所述酸溶性膠原蛋白加入最終濃度為0.9～1mol/L的NaCl溶液，離心，收集沉淀溶于0.5mol/L醋酸溶液中，采用濃度為0.1mol/L的醋酸溶液透析1～3天，再用蒸餾水透析2～6d，凍干后得到所述魚膠原蛋白；
將所述魚膠原蛋白溶解至去離子水中，用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至6.0，調(diào)節(jié)魚膠原蛋白濃度，得膠原蛋白水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠，其特征在于，所述配制羧基化碳納米管溶液方法為：取長(zhǎng)度為10～30μm、導(dǎo)電性能大于90s/cm、純度>90％的羧基化單壁碳納米管，溶解于純水中，然后超聲分散，得羧基化碳納米管溶液，調(diào)節(jié)羧基化碳納米管溶液的濃度為10mg/mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠，其特征在于，所述提取藻紅蛋白的方法為：將紫球藻藻體置于緩沖液中，反復(fù)凍融破碎，藻體和緩沖液的重量體積比為1：10，凍融5～8次，選用飽和度為20～60％的硫酸銨進(jìn)行鹽析沉淀，然后采用質(zhì)量份數(shù)為2％的殼聚糖吸附法純化，再經(jīng)0.3mol/L的NaCl溶液洗脫得上清液，最后經(jīng)超濾除鹽后，以pH值為6.0的PBS緩沖液調(diào)整藻紅蛋白的濃度，得到不同濃度的藻紅蛋白溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的含有藻紅蛋白的復(fù)合凝膠，其特征在于，經(jīng)過(guò)超濾除鹽后的藻紅蛋白溶液純度A545nm/A280nm>4.5。
6.權(quán)利要求1～5任意一項(xiàng)所述的藻紅蛋白/膠原蛋白/羧基化碳納米管/聚丙烯酰胺復(fù)合凝膠在制備敏化太陽(yáng)能電池中的應(yīng)用。
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