[發明專利]一種棕櫚酰化七肽、及其純化方法和應用

有效

• 申請號: 201710199434.2
• 申請日: 2017-03-29
• 公開（公告）號: CN106916203B
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 曾巧輝
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16;A61K8/64;A61K38/08;A61Q19/08;A61Q17/04;A61P35/00;A23L33/18
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 廖曉霞

本發明提供了一種棕櫚酰化七肽及其純化方法和應用，通過棕櫚酰化修飾七肽獲得增強多肽抗腫瘤活性的多肽。獲得的棕櫚酰化七肽的氨基酸序列如下所示：Palm?Glu?Tyr?Phe?Asp?Ala?Leu?Ala，縮寫為Palm?EYFDALA，分子量1066.34Da。本發明獲得的棕櫚酰化七肽具有增強的抗腫瘤活性，同時還具有抗衰老活性，可應用于生物制藥、食品、化妝品等領域。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及一種棕櫚酰化七肽、及其在抗腫瘤制劑、化妝品或食品中的應用。

背景技術

根據世界衛生組織(WHO)統計，全世界有3/5的人死于癌癥、糖尿病、心血管疾病、慢性呼吸系統疾病這4大類疾病，而癌癥則是最主要的死因之一。2008年全球死于癌癥的患者達760萬人，占全球死亡人數的13％，其中超過70％的癌癥死亡案例發生在中低收入國家，預測至2030年，全球將有超過110萬人死于癌癥。目前，對于癌癥的治療，藥物治療仍然是重要手段之一。因此，研究開發具有抗腫瘤活性的物質或制劑也一直是本領域技術人員的研究熱點之一。

小分子肽是一類具有高活性的肽類物質，小分子肽可以以完整的形式被機體吸收；主動吸收、低耗或不需消耗能量的特點；能夠直接進入血液循環并送到人體各個部位，廣泛應用于生物醫藥領域。由于具有親水性，蛋白質通常難以跨生物膜轉運，因此，提高其膜滲透性改善其細胞內化率是重要的科學問題。通過對小分子肽進行修飾使其性能得以改善，也是本領域技術人員的研究方向之一。而開發具備抗腫瘤活性的小分子肽更是備受關注。

棕櫚酰化是蛋白質翻譯后脂質修飾的重要形式之一，在細胞信號傳導、代謝、凋亡、疾病的發生、發展等過程中都起著重要的作用。根據連接方式不同，棕櫚酰化可分為N型(棕櫚酸鹽通過酰胺鍵連接到Gly/Cys殘基上)和S型(棕櫚酸鹽通過硫酯鍵共價修飾到Cys的巰基上)。

發明內容

本發明提供一種經棕櫚酰化的七肽(Palm-EYFDALA)，本發明的棕櫚酰化七肽相比于未經棕櫚酰化的七肽具有明顯增強的抗腫瘤活性，而且具有很好的抗氧化活性，可應用于生物制藥和化妝品領域。

本發明提供的棕櫚酰化七肽，縮寫為Palm-EYFDALA，分子量1066.34Da，序列為Palm-Glu-Tyr-Phe-Asp-Ala-Leu-Ala，其化學結構式如下：

其中，前文序列中的Palm表示英文名稱為Palmitoyl，中文名稱為棕櫚酰基；Glu表示英文名稱為Glutamic acid，中文名稱為谷氨酸的氨基酸的相應殘基；Tyr表示英文名稱為Tyrosine，中文名稱為酪氨酸的氨基酸的相應殘基；Phe表示英文名稱為phenylalanine，中文名稱為苯丙氨酸的氨基酸的相應殘基；Asp表示英文名稱為Aspartic acid，中文名稱為天冬氨酸的氨基酸的相應殘基；Ala表示英文名稱為Alanine，中文名稱為丙氨酸的氨基酸的相應殘基；Leu表示英文名稱為Leucine，中文名稱為亮氨酸的氨基酸的相應殘基。

本發明還提供上文所述的棕櫚酰化七肽的純化方法，可通過該方法來純化通過多肽固相合成的棕櫚酰化七肽，從而獲得純度大于95％的多肽。該方法包括如下步驟：

將待純化的棕櫚酰化七肽上樣至色譜柱；

以流動相A和流動相B為洗脫液進行梯度洗脫，其中流動相A為含有0.08～0.12％三氟乙酸的乙腈溶液，流動相B為含有0.08～0.12％三氟乙酸的水；梯度洗脫程序為：流動相A的初始體積比例為22～28％，在上樣后的第0.01min到第25min內，流動相A的體積比例上升到62～67％，在第25min到第25.1min內，流動相A的體積比例上升為100％，保持100％運行至第30min停止，檢測波長為220nm；收集目標峰的多肽溶液。

進一步的，所述色譜柱為C₁₈色譜柱。