[發明專利]一種煙薯25號組培脫毒苗的生產及馴化移栽方法

在審

• 申請號: 201710198570.X
• 申請日: 2017-03-29
• 公開（公告）號: CN107114237A
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 王立國;王剛;李燕;李建軍;高翔;張嘉
• 申請（專利權）人: 天津豐華裕隆農業發展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00
• 代理公司: 天津市新天方有限責任專利代理事務所12104
• 代理人: 張強

1.一種煙薯25號組培脫毒苗的生產及馴化移栽方法，其特征在于，具體步驟為：

(1)煙薯25號組培脫毒苗的獲取

催芽：秋天甘薯收獲后，選用無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬4天，用清水洗凈，在薯塊上覆蓋3cm的沙子，放入36℃培養箱中催芽；

莖尖剝取與培養：當芽苗長至15cm時，取頂端1-2cm，減去肉眼可見的葉片，先用清水沖洗，然后在超凈工作臺內用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗6-10次；在體視解剖鏡下剝取帶有l-2個葉原基的莖尖，接種到添加0.2mg·L^-1NAA和2.0mg·L^-1BAP的MS培養基上進行培養，誘導不定芽形成；當不定芽長到2cm時，從基部切下，轉移到不添加生長調節劑的MS培養基上培養，使其長成完整植株；采用ELISA病毒檢測試劑盒進行病毒檢測，摘取經病毒檢測脫除病毒的無毒苗的1-2個葉節作為一個切段，扦插入新的MS培養基中，擴大繁殖；培養溫度為26℃，采用13h·d^-1的光照，光照強度為30μmol·m^-2·s^-1；

(2)煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽

繼代培養1個月的脫毒苗，逐漸打開瓶口馴化，直至最后瓶口打開一半；洗去附著在根部的培養基，分單株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株間距30cm；脫毒試管苗栽植后，大水澆透，保持塑料大棚中的空氣濕度；移栽后的前2周，上午搭遮蔭網，防止太陽直曬；2周后撤掉遮蔭網，中午放風，澆水；移栽3周后撒施尿素隨即澆水，施肥量按7g·m^-2。

2.根據權利要求1所述的一種煙薯25號組培脫毒苗的生產及馴化移栽方法，其特征在于，煙薯25號組培脫毒苗的獲取過程中，催芽的條件為：出芽前進行黑暗培養，出芽后光照培養，采取12h·d^-1的光照，光照強度為15-20μmol·m^-2·s^-1，過程中噴水保持沙子濕潤。

3.根據權利要求2所述的一種煙薯25號組培脫毒苗的生產及馴化移栽方法，其特征在于，煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽過程中，在塑料大棚兩頭加防蟲網，預防昆蟲進入塑料大棚傳播病毒而導致脫毒苗再次感染病毒。