[發明專利]一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白及其應用有效
| 申請號： | 201710197757.8 | 申請日： | 2017-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN107082812B | 公開（公告）日： | 2018-11-13 |
| 發明（設計）人： | 岳喜連;劉根桃;吳國祥 | 申請（專利權）人： | 上?？漆t聯創生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/85;A61K38/17;A61K38/20;A61P35/00;A61P31/12 |
| 代理公司： | 上海申新律師事務所 31272 | 代理人： | 俞滌炯 |
| 地址： | 201321 上海市浦東新區中國*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 恢復 衰竭 免疫 細胞 功能 融合 蛋白 及其 應用 | ||
1.一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白，其特征在于，包含識別衰竭性免疫細胞的功能區和激活擴增衰竭性免疫細胞的功能區，兩個功能區通過一定長度的非功能性氨基酸片段連接；
其中，所述識別衰竭性免疫細胞的功能區是利用免疫檢查點特異性抗體識別衰竭性免疫細胞的表型受體，所述衰竭性免疫細胞的表型受體是具有共抑制性功能的免疫檢查點，所述激活擴增衰竭性免疫細胞的功能區是采用細胞因子或功能類似突變體；
其中，所述衰竭性免疫細胞的表型受體包括PD-1，所述表型受體的特異性抗體包括PD-1抗體，所述細胞因子或功能類似突變體包括IL-2；
其中，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示。
2.根據權利要求1所述的一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白，其特征在于，所述PD-1為SEQ ID NO：1所示序列。
3.根據權利要求1所述的一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白，其特征在于，根據如下步驟制備所述融合蛋白：
步驟1)由人PD-1抗體重鏈的C端和IL-2的N端氨基酸序列通過非功能氨基酸連接，組成融合蛋白重鏈構造基因；
步驟2)將步驟1)所述的融合蛋白重鏈構造基因和合成的PD-1抗體的輕鏈基因共轉入表達載體，并轉染至倉鼠卵巢細胞；
步驟3)將步驟2)所述的倉鼠卵巢細胞放置在孵箱中培養一段時間，取上清液，純化后制得重組融合蛋白。
4.根據權利要求3所述的一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白，其特征在于，所述表達載體為真核動物表達載體pcDNA3.1。
5.根據權利要求1所述的一種恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白，其特征在于，所述衰竭性免疫細胞為衰竭的特異性T細胞、衰竭的NK細胞中的至少一種。
6.一種如權利要求1～5中任一項所述的恢復衰竭性免疫細胞功能的融合蛋白的應用，其特征在于，所述應用為在制備治療因免疫細胞衰竭而引起的疾病的藥物中的應用。
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