[發明專利]Psoriasin抗體和LL?37抗體在制備防治銀屑病的藥物中的應用

在審

• 申請號: 201710196902.0
• 申請日: 2017-03-29
• 公開（公告）號: CN106943594A
• 公開（公告）日: 2017-07-14
• 發明（設計）人: 鄭焱;李昌吉;楊珮雯;邵永平
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61P17/06
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所61215
• 代理人: 劉國智

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及Psoriasin抗體和LL-37抗體在制備防治銀屑病的藥物中的應用。

背景技術

銀屑病是一種發病率高，易復發，嚴重影響患者的生活質量的慢性炎癥性皮膚病。銀屑病的病理表現為表皮角質形成細胞(keratinocyte，KC)過度增殖，異常分化，真皮淺層血管迂曲增生擴張，真表皮炎癥細胞浸潤，浸潤的主要細胞為中性粒細胞和T淋巴細胞，在急性期，可見中性粒細胞形成的Munro微膿瘍，慢性期主要為T淋巴細胞浸潤。目前多采用維A酸類藥物進行治療，但效果不佳且易復發，后期副作用也較大，小分子生物療法雖然效果較好，但費用極高，患者難以承受，且遠期復發率并未降低，故目前銀屑病的治療成為研究的重點問題。

眾所周知，皮膚是外界微生物進入機體的天然屏障，銀屑病雖然表皮屏障被破壞，卻很少發生皮損的局部感染，這一現象與銀屑病皮損中存在大量的抗菌蛋白相關，這些抗菌蛋白包括psoriasin、防御素和LL-37，其在炎癥或感染時由KC或浸潤的炎性細胞產生，其不僅有抗微生物的作用，且可趨化免疫細胞，刺激KC及浸潤的免疫細胞產生一系列的前炎性因子，從而調節靶細胞的增殖、凋亡和分化。研究表明，在銀屑病中，真皮變化早于表皮，發病最初是真皮淺層血管通透性增加導致一系列炎癥細胞的浸潤和血管的增生。研究表明，在銀屑病初始發病中，真皮血管通透性增加導致一系列炎癥細胞的游出和分化，這些炎癥細胞主要有中性粒細胞、Th1細胞、Th17細胞及漿細胞樣樹突狀細胞(plasmicdentriticcell，pDC)。受損細胞釋放自身的DNA和RNA，后兩者均可與抗菌肽LL-37結合形成復合物(銀屑病患者表皮角質形成細胞可產生大量的LL-37)，這些復合物可活化pDC并使之產生干擾素α(interferon，IFN)；其也可產生IL-1β、IL-6和TNFα，這些均可促進KC分泌INFα。而后者可促進DC的成熟并分泌IL-12和23，從而使幼稚T細胞向Th1和Th17細胞分化，并通過淋巴管和血管，到達病灶區域。在此區域，Th1細胞產生TNFα和IFNγ，Th17細胞分泌IL-17和IL-22，從而促進KC的增殖和血管新生。故Th17細胞的成熟在銀屑病炎性因子的浸潤和血管新生及KC增殖中均有重要作用。

Psoriasin最初是由Madsen等于1991年從銀屑病患者異常增生的角質細胞中分離得到。編碼該蛋白的基因位于人染色體1q21表皮分化復合物區的S100基因簇，因此它可能在表皮的生物學功能中起重要作用，其在銀屑病的KC中表達升高，其后，在膀胱鱗狀細胞癌，原位乳癌和侵襲性乳癌中均有較高表達，人腦和視網膜色素上皮細胞中也檢測到psoriasin的表達。psoriasin的分泌可由多種因素誘導，在紫外線、促炎癥性細胞活素(如IL-1、IL-17、TNF-α、制瘤素-M)和細菌鞭毛蛋白等條件的刺激下，psoriasin的分泌量也會相應增加。psoriasin能夠通過上調炎性通路來促進乳腺腫瘤的形成。psoriasin的滅菌作用得益于它與Zn²⁺結合的特性。Zn²⁺是細菌進行正常新陳代謝的關鍵元素，而psoriasin可通過與Zn²⁺螯合來抑制細菌的生長和繁殖。同時，在PH＜6的酸性條件下，psoriasin還可引起細菌生物膜結構的穿孔。

抗菌肽LL-37是目前在人體中發現的cathelicidins家族的唯一成員。1995年Cowland等報道從人骨髓中性粒細胞中發現了一種具有α-螺旋結構的cathelicidin CAP-18(hCAP-18)，其是LL-37的前體。hCAP-18/LL-37編碼基因位于人染色體3p21.3，含有3個內含子和4個外顯子，其中第4個外顯子編碼成熟肽LL-37[10]。LL-37存在于人體多種細胞中。除了在上皮組織中有表達外，LL-37在人中性粒細胞、NK細胞和肥大細胞中也會持續表達。目前已知天然免疫系統中表達LL-37的其它細胞有樹突狀細胞單核細胞、巨噬細胞、在間充質干細胞和骨髓基質。在銀屑病皮損中，LL-37高表達于表皮全層的KC細胞質和浸潤的中性粒細胞中，其可分泌游離出細胞存在于細胞間質中。LL-37具有抗Gram陽性、陰性菌，真菌及病毒的活性。除抗菌作用外，LL-37還可刺激肥大細胞脫顆粒并可趨化中性粒細胞，單核細胞，肥大細胞和巨噬細胞。LL-37有促進血管的形成和生長、促進傷口愈合的功能。