[發(fā)明專利]一種硅烷化磁性纖維素微球固定脂肪酶的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710196256.8
• 申請(qǐng)日: 2017-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN107326022A
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付玉杰;洪麗;韓盈枝;王希清;姚麗萍;王微;趙春建
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N11/12
• 分類號(hào): C12N11/12;C12N9/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種硅烷化磁性纖維素微球固定脂肪酶的方法，具有以下的制備過程和步驟：

a.反相懸浮技術(shù)制備磁性纖維素微球：利用堿化作用破除纖維素材料的氫鍵，再通過老化、磺化過程降低分子聚合度，生成可溶性的纖維素粘膠液，以碳酸鈣為制孔劑，與纖維素膠粘液攪勻后加入分散相中，利用反相懸浮技術(shù)分散成液滴，同時(shí)升溫固化成球形，并利用碳酸鈣和鹽酸發(fā)生的復(fù)分解反應(yīng)對(duì)纖維素微球制孔；采用共沉淀法將Fe³⁺和Fe²⁺在堿性條件下沉積于微球表面，形成磁性纖維素微球；

b.硅烷化技術(shù)改性纖維素微球：將已制得的磁性纖維素微球置于硅烷化溶劑中，加入硅烷化試劑，利用硅烷化改性技術(shù)制得硅烷化磁性纖維素微球；

c.交聯(lián)-共價(jià)鍵法固定脂肪酶：以戊二醛為交聯(lián)劑，活化磁性硅烷化纖維素微球載體上的氨基，將活化后的載體與酶液混合，使載體上的氨基與脂肪酶分子表面的氨基酸殘基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成共價(jià)鍵，制得磁性纖維素微球固定化脂肪酶催化劑。

2.按照權(quán)利要求1所述的一種硅烷化磁性纖維素小球固定脂肪酶的方法，其特征在于步驟a中的纖維素材料為脫脂棉、棉麻纖維、微晶纖維素、玻璃纖維中的一種或幾種。

3.按照權(quán)利要求1所述的一種硅烷化磁性纖維素小球固定脂肪酶的方法，其特征在于步驟b中所采用的硅烷化改性試劑為APTES，溶劑為異丙醇與水的混合物，硅烷化時(shí)間為4～8h。

4.按照權(quán)利要求1所述的一種硅烷化磁性纖維素小球固定脂肪酶的方法，其特征在于步驟c中所描述的固酶條件為：每克纖維素微球添加18～20mL 25％戊二醛水溶液，350～400μL酶液，溶液pH＝6～8，固載時(shí)間為4～8h。

5.按照權(quán)利要求1～4制備的硅烷化磁性纖維素微球固定化脂肪酶催化劑，其特征在于在轉(zhuǎn)酯化、酯化及水解反應(yīng)中的催化作用。