[發明專利]一種ASE?HPLC法測定人參中人參皂苷Rg1和Re含量的方法

在審

• 申請號: 201710195525.9
• 申請日: 2017-03-29
• 公開（公告）號: CN107064344A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 廖強;韋日偉;陳學松
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 黃為

技術領域

本發明屬于化學檢測領域，尤其是一種ASE-HPLC法測定人參中人參皂苷Rg1和Re含量的方法。

背景技術

人參是我國地道藥材中應用最廣泛的代表，人參皂苷是人參的主要藥效成分，人參皂苷具有增強記憶力，提高免疫力，改善心血管，調節內分泌，延緩衰老和抗腫瘤等功能，人參皂苷的含量測定已經成為國內外研究的熱點。

但是在測定過程中，由于樣品中的色素雜質過多，從而造成測定結果不準確，因此建立有效除雜并測定準確的人參皂苷檢測方法對人參及其制劑的質量控制具有重要意義。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在將ASE(快速溶劑萃取法)、GCB(石墨化炭黑)和HPLC(高效液相色譜法)三者有效結合，從而提高測定的準確率以及穩定性，提高方法的重復性的一種ASE-HPLC法測定人參中人參皂苷含量的方法，且該方法可同時測定人參中的人參皂苷Rg1和Re。

為了解決上述技術問題，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE-HPLC法測定人參葉中人參皂苷Rg1和Re含量的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：采用ASE對粉碎后的人參進行甲醇萃取，取1ml萃取液與75mg石墨化炭黑混合，過濾，得甲醇萃取液；

步驟2：采用HPLC法檢測甲醇萃取液中人參皂苷Rg1和Re的含量。

進一步的，所述的步驟1包括下述子步驟：

步驟S1：將樣品粉碎，過三號篩，取過篩后的粉末0.2g；

步驟S2：將0.2g的人參粉末與1g硅藻土混合，裝于放有過濾膜的5ml ASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行；

步驟S3：用甲醇萃取，蒸干，加甲醇溶解，并用甲醇定容至10ml；

步驟S4：取1ml步驟S3所得溶液與75mgGCB混合，漩渦振蕩1min，離心，取上清液過0.22微米濾膜后得甲醇萃取液。

進一步的，步驟S3所述的萃取，參數如下：萃取溫度為110℃，萃取時間為7min，萃取次數為3次，沖洗體積為80％，吹掃時間為60s。

進一步的，步驟2所述的HPLC法的檢測參數為：色譜柱為Thermo Syncronis Dim.AQ，1.7μm，50×2.1mm；柱溫為40℃；流速為0.3mL/min；流動相為體積比等于18:82的乙腈-水；檢測波長：203nm。

進一步的，步驟S4所述的離心參數為：速度為10000r/min，時間為4min。

進一步的，步驟1所述的萃取所采用的儀器為美國DIONEX公司的ASE350快速溶劑萃取儀；步驟2所述的HPLC法檢測所采用的儀器為Agilent 1290高效液相色譜儀。

本發明與傳統方法相比，具有以下優點：

1.本發明曾對快速溶劑萃取使用的溶劑進行考察，使用過正己烷飽和的甲醇和甲醇兩種溶劑進行提取，結果顯示甲醇提取和藥典方法的含量一致且雜質峰基本相同，正己烷飽和的甲醇提取的樣品含量偏低，故采用與藥典一致的提取溶劑；

2.本發明曾對提取并定容后的樣品進行凈化，分別取定容后的樣品1.00mL分別加入到裝有25mg、50mg、75mg、100mg的GCB的2ml離心管渦旋1min，10000r/min離心4min后吸取上清液過濾上機測定。結果表明GCB能優先吸附色素使樣品中的雜質明顯降低，但當色素被吸附完全后樣品中待測成分就有可能GCB吸附，故選擇75mg的GCB添加量。

3.本發明將ASE(快速溶劑萃取法)、GCB(石墨化炭黑)和HPLC(高效液相色譜法)三者有效結合，從而提高測定的準確率以及穩定性，提高方法的重復性的方法，且該方法可同時測定人參中的人參皂苷Rg1和Re。

附圖說明

圖1為人參皂苷Rg1以濃度(mg)-峰面積進行線性回歸圖；

圖2為人參皂苷Re以濃度(mg)-峰面積進行線性回歸圖；

圖3為人參皂苷Rg1和Re對照品圖譜圖；

圖4為ASE法萃取的樣品圖譜圖；

圖5為藥典方法提取的樣品圖譜；

圖6為使用不同量的GCB對樣品雜質的影響圖。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍內所做的有限次的修改，仍在本發明的權利要求保護范圍之內。

實施例1

1.儀器設備及試劑

1.1儀器：