[發明專利]動物頭顱快速解剖及完整腦部組織分離方法

在審

• 申請號: 201710194059.2
• 申請日: 2017-03-28
• 公開（公告）號: CN107019576A
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發明（設計）人: 儲明星;劉秋月;賀小云;狄冉;王翔宇;胡文萍
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及生命科學領域，尤其是一種動物頭顱快速解剖及完整腦部組織分離方法。

背景技術

動物的腦部是控制其行為和支配一切生命活動的中樞，主要包括大腦、小腦、下丘腦、垂體等組織。大腦支配動物的一切生命活動(如：語言、運動、聽覺、視覺、情感表達等)，夠調節消化、呼吸、循環、泌尿、生殖、運動等中樞；小腦通過它與大腦、腦干和脊髓之間豐富的傳入和傳出聯系，參與軀體平衡和肌肉張力(肌緊張)的調節，以及隨意運動的協調；下丘腦是大腦皮層下調節內臟活動的高級中樞，能把內臟活動和其它生理活動聯系起來，調節體溫、采食、內分泌腺活動以及機體水平衡等重要生理功能；垂體是動物體內主要的內分泌腺體，分泌多種激素，如促性腺激素、生長激素、促甲狀腺激素、催產素、催乳素等，還能接受下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素，這些激素對于動物的新陳代謝、生長發育、生殖生理等有重要作用。采集完整無污染的腦部組織對于提取組織RNA，研究腦部功能有重大意義。

現有的動物(如綿羊)腦部組織樣品的采集方法主要是用電鋸或者斧頭縱向劈開頭顱，將之分成兩半，在劈開后，尋找采集大腦、小腦、下丘腦、垂體等腦部組織。此方法獲得的腦部組織受機械損傷較大，易將大腦、小腦、下丘腦、垂體等組織弄碎，造成污染和損失，且操作人員的熟練程度對腦部組織的采集影響很大；由于腦部完整性較差，某些組織的尋找耗時較長，降低采樣效率，同時樣品由于長時間暴露在空氣中造成降解，對提取RNA進行后續實驗的樣品有毀滅性的影響。

發明內容

本發明的目的是提供一種解剖動物頭顱并獲取完整腦部組織的方法，該方法操作時間短、樣品完整性好、污染和組織損傷機率低、簡單易行，克服了現有技術的不足。

本發明是這樣實現的：動物頭顱快速解剖及完整腦部組織分離方法，包括以下步驟：

(1)取已屠宰的動物頭部，固定在臺虎鉗上，在垂直于動物鼻骨的方向用手術刀去除兩眼間的頭骨皮膚，同時去除兩耳間頭頂部至枕骨間的皮膚，使暴露的頭骨呈“T”字樣；

所述動物包括綿羊、山羊、豬、牛等；

(2)用電鋸或手鋸入骨一定深度，以穿透頭骨且不損傷腦組織為準，沿“T”字垂直于地面切入頭部；

對于綿羊和山羊以入骨0.5-1.0cm為佳；

(3)用手術刀從枕骨上緣0.5cm處至兩側眼眶沿臉頰切開皮膚，用手鋸沿切口入骨一定深度，以穿透頭骨且不損傷腦組織為準，切入頭部；

對于綿羊和山羊以入骨1.0-1.5cm為佳；

(4)用骨鑿插入“T”字切口輕撬，將大腦外的兩側頭骨分離取走，暴露完整腦部組織；

(5)用手術剪和眼科鑷剝離腦膜，取出大腦、小腦、下丘腦及其它腦部組織；

(6)取出大腦后，可用眼科剪將垂體從垂體窩里取出。

進一步地，上述方法還包括將取下的動物大腦、小腦、下丘腦和垂體等組織取下后裝入凍存管中，立即放入液氮保存；或者將腦組織置于裝有4％多聚甲醛的50ml離心管盛裝后于4℃保存。

本發明方法適用于綿羊、山羊、豬、牛等；不同動物鋸子的入骨深度、切開長度等一些參數需要調整，不同動物的開口位置基本一致。

具體地，本發明提供一種動物頭顱快速解剖及完整腦部組織分離方法，包括以下步驟：

(1)取已屠宰的綿羊或山羊頭部，固定在臺虎鉗上，在垂直于綿羊鼻骨的方向用手術刀去除兩眼間的頭骨皮膚，同時去除兩耳間頭頂部至枕骨間的皮膚，使暴露的頭骨呈“T”字樣；

(2)用電鋸或手鋸入骨0.5-1.0cm，沿“T”字垂直于地面切入羊頭；

(3)用手術刀從枕骨上緣0.5cm處至兩側眼眶沿臉頰切開皮膚，用手鋸沿切口入骨1.0-1.5cm切入羊頭；

(4)用骨鑿插入“T”字切口輕撬，將大腦外的兩側頭骨分離取走，暴露完整腦部組織；

(5)用手術剪和眼科鑷剝離腦膜，取出大腦、小腦、下丘腦及其它腦部組織；

(6)取出大腦后，可用眼科剪將垂體從垂體窩里取出。

與現有技術相比，本發明能夠快速的將動物的頭骨分開，獲取完整、無污染的大腦、小腦、垂體、下丘腦等腦部組織樣品，與傳統斧頭劈開頭骨的方法相比，提高了腦部各組織樣品采集的完整性，降低了操作污染和樣品損壞的風險，方法簡單，耗時短，使用效果好，對于大規模動物屠宰試驗中樣品的采集有良好的應用前景。

附圖說明

圖1為實施例1切口位置示意圖；圖1中A、B、C表示切口，切口C為兩側對稱切口。