[發明專利]區分大理重樓和云南重樓的方法

有效

• 申請號: 201710188767.5
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN106872616B
• 公開（公告）日: 2019-12-06
• 發明（設計）人: 劉圓;黃鐘杰;張紹山;余孟杰
• 申請（專利權）人: 西南民族大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 11491 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 郭偉紅<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明提供了區分大理重樓和云南重樓的方法，其特征在于：它是采用液相色譜法檢測，若檢測到含有重樓皂苷VII、H，不含纖細薯蕷皂苷、重樓皂苷I、II或含量均低于0.010％，則可判定為大理重樓。上述檢測方法，簡單、準確、分析時間短、穩定性好，可以用于大理重樓與云南重樓的區分。

技術領域

本發明涉及中藥材檢測領域，具體涉及區分大理重樓和云南重樓的方法。

背景技術

《中華人民共和國藥典》2015年版一部收載重樓品種為百合科植物云南重樓Parispolyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七葉一枝花Parispolyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根莖，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚的功效。現代研究表明，重樓具有抗腫瘤、止血、免疫調節、鎮靜、鎮痛等作用，甾體皂苷成分為發揮作用的主要活性成分。近年來，因重樓市場需求巨大、野生資源瀕危及人工繁育技術要求高、栽培周期長等多因素導致重樓價格飆升，從十年前的50元/kg上漲到700～900元/kg。

大理重樓Paris daliensis H.Li et V.G.Souku和獨龍重樓Paris dulongensisH.Li et S.Kuritap隸屬百合科Liliacceae重樓屬Paris，根莖在云南、貴州等各地民間也作為重樓藥材使用，味苦，性微寒，有小毒，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效，用于癰瘡、咽喉腫痛、毒蛇咬傷、跌打損傷、涼風抽搐等癥。目前尚未收錄到2015年版《中國藥典》或者各省級藥材標準中。由于以云南白藥為代表等系列藥品對重樓類根莖的需求量日益加大，重樓屬很多植物的根莖，包括大理重樓和獨龍重樓均作為重樓藥材大量被收購，而大理重樓和獨龍重樓可否作為重樓藥材的來源以及它們的資源儲備如何，可否滿足市場需求的研究報道很少，因此，很有必要云南重樓的親緣品種進行基礎研究，為藥材供應提供依據。

目前還未見可以在大理重樓與云南重樓的混合品中準確區分兩者的方法。當然，也未見區分大理重樓和獨龍重樓的方法。

發明內容

2015年版《中國藥典》中，以重樓皂苷Ⅰ、重樓皂苷Ⅱ、重樓皂苷Ⅵ和重樓皂苷Ⅶ的質量分數作為評價重樓質量指標，專利申請2016106653439中也記載，云南重樓中主要含有重樓皂苷VII、H、II、I，纖細薯蕷皂苷也會在部分云南重樓中出現，然而，大理重樓卻只含重樓皂苷VII和H，不有重樓皂苷II、I和纖細偏諾皂苷。因此，與云南重樓相比，大理重樓所含化學成分中主要有重樓皂苷VII和H，而不含有重樓皂苷II、I和纖細偏諾皂苷，因此，可以通過上述成分將大理重樓與云南重樓鑒別分開。

具體地，本發明提供了區分大理重樓和云南重樓的方法，它是采用液相色譜法檢測，若檢測到含有重樓皂苷VII、H，不含纖細薯蕷皂苷、重樓皂苷I、II或含量均低于0.010％，則可判定為大理重樓，即可以在大理重樓和云南重樓的混合品中，通過上述方法鑒定出大理重樓，達到區分的效果。

進一步地，其中，重樓皂苷VII的含量在0.3％以上；重樓皂苷H的含量在0.3％以上。

進一步地，其中，不含重樓皂苷VI或者重樓皂苷VI的含量低于0.02％。

進一步地，其中，重樓皂苷VII、VI、II和I的總含量在0.3％以上；重樓皂苷VII、VI、II、I、H和纖細薯蕷皂苷的總含量在1.4％以上。

其中，所述液相色譜法選自UPLC，本發明色譜條件可以采用已知方法進行檢測，如專利申請2016106653439，也可以按照本發明下述條件進行：所述UPLC的具體操作如下：

(1)取干燥的待檢樣品，粉碎，以醇類溶劑或含水醇類溶劑提取，合并提取液，除去溶劑后所剩殘渣用甲醇、含水甲醇、乙腈或含水乙腈復溶，制備供試品溶液；

(2)取重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、H、纖細薯蕷皂苷的混合物，制備對照品溶液；